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摘要:目的 探讨敲除Toll样受体2(toll-like receptor2,TLR2)基因后是否抑制同种异体小鼠角膜排斥反应的发生.方法 以BALB/c为供体,各取30只C57BK/6和同背景TLR2基因敲除鼠为受体行右眼角膜移植术,设为野生组(WT)和基因敲除组(KO);取19只C57BL/6行右眼自体角膜移植术,为自体组(ISO);各取9只C57BK/6和TLR2基因敲除鼠分别设为野生对照组(WT control)和基因敲除对照组(KO control).术后每周两次观察植片并记录免疫排斥的发生时间;术后14 d,收集术眼同侧颈部淋巴结,行流式细胞术分析CD4+T细胞百分比;收集术眼角膜,行免疫组织化学染色和实时荧光定量PCR检测角膜干扰素(interferon,IFN)-γ、TLR2和MyD88的表达.结果 WT组和KO组小鼠角膜移植术后中位生存时间KO组(35.0±3.8)d长于WT组(21.0±1.5)d(P <0.05).流式细胞术分析显示,WT组同侧颈部淋巴结CD4+T细胞百分比较WT control组明显增高(P<0.05),而ISO和KO组相对于其对应的control组(WT/KO control)差异均无统计学意义(均为P>0.05);免疫组织化学结果显示,ISO和KO组间角膜IFN-γ和MyD88分子表达无差异,但两者均低于WT组.KO组角膜几乎不表达TLR2分子,ISO组有微量表达,WT组表达明显增高;PCR检测显示,ISO和KO组角膜IFN-γ和TLR2 mRNA相对表达量差异均无统计学意义(均为P>0.05),但两者均低于WT组(均为P<0.05);KO组角膜MyD88 mRNA相对表达量比ISO组高(P<0.05),但两者均低于WT组(均为P<0.05).结论 敲除TLR2基因可以一定程度抑制同种异体小鼠角膜排斥反应的发生....
摘要:目的 探究Toll样受体2(Toll like receptor 2,TLR2)是否通过调节辅助性T细胞(T helper cells,Th)极化影响角膜移植排斥反应的发生.方法 取30只C57BL/6小鼠和30只TLR2基因敲除小鼠为受体,BALB/c小鼠为供体,在受体小鼠右眼行同种异体角膜移植术,分别为野生组和基因敲除组;取19只C57BL/6小鼠右眼行自体角膜移植术,为自体组.术后每周两次裂隙灯下观察植片水肿程度和透明度,参照Sonoda评分标准对排斥指数(reject index,RI)进行评分;术后14 d收集角膜.分别取9只C57BL/6小鼠和TLR2基因敲除小鼠作为野生对照组和基因敲除对照组,行常规HE染色和实时荧光定量PCR检测.结果 术后随时间变化各手术组植片水肿和混浊程度不一,以野生组最为严重.角膜RI评分显示术后7d、14 d、21 d,基因敲除组(0.80 ±0.83、0.90±0.55、1.35±0.99)低于野生组(1.55 ±0.94、2.25 ±0.97、2.55±1.19),差异均有统计学意义(P=0.008、0.000、0.000).HE染色显示,野生组角膜基质层出现水肿和大量炎性细胞;而基因敲除组和自体组炎症反应较轻.PCR检测显示,基因敲除组角膜Th1和Th17细胞因子(IFN-γ和IL-17)mRNA表达(1.94±0.34、2.62±0.30)比野生组(4.27±0.37、3.99±0.40)低,差异均有统计学意义(P=0.000、0.001);Th2细胞因子(IL-4)三组差异无统计学意义(P>0.05).结论 敲除TLR2可能通过抑制Th向Th1和Th17极化,降低角膜移植排斥率....
摘要:目的 研究不同浓度肽聚糖对角膜上皮细胞Toll样受体(Toll-like receptor,TLR)2和TLR4表达的影响.方法 原代培养C57小鼠角膜上皮细胞,随机分为对照组(无肽聚糖刺激)及按照肽聚糖刺激浓度分为10 mg·L-1组、30 mg·L-1组、80 mg·L-1组(作用时间均为12 h);按照肽聚糖刺激时间分为12 h组、24 h组、36 h组(作用浓度均为30mg·L-1),应用实时荧光定量PCR与流式细胞术检测各组TLR2、TLR4 mRNA和蛋白的表达量.结果 与对照组(1.00±0.14、1.00±0..01)相比,10 mg·L-1组(4.35±0.46、3.53±0.50)、30 mg· L-1组(8.06±0.72、5.31±0.34)、80 mg· L-1组(2.93±0.46、2.23±0.04)的TLR2、TLR4 mRNA表达增加,差异均有统计学意义(均为P<0.05);与对照组(1.00±0.14、1.00±0.01)相比,12h组(2.94±0.46、2.23±0.50) TLR2、TLR4 mRNA表达增加,差异均有统计学意义(均为P<0.05).与对照组相比,各浓度组和12 h组角膜上皮细胞TLR2、TLR4蛋白表达均增加,差异均有统计学意义(均为P<0.05).结论 肽聚糖可以刺激小鼠角膜上皮细胞TLR2、TLR4 mRNA和蛋白表达增加,提示感染性角膜炎的发生、发展可能与角膜上皮细胞TLR2、TLR4识别病原体并参与炎症反应有关....
[硕士论文] 孟婷
眼科学 南方医科大学 2018(学位年度)
摘要:目的:
  探讨散瞳是否会对白内障患者眼前节生物学参数产生影响,进而使人工晶体计算产生偏差,影响术后裸眼视力;动态观察散瞳前后眼前节拥挤程度等解剖变化。
  方法:
  本研究为前瞻性观察性研究,选取在我院住院欲行白内障手术的患者,术前进行全身和双眼局部检查,测量散瞳前后眼前节生物学参数,计算人工晶体度数。所有测量均由同一经验丰富的操作者完成,使用美多丽(复方托吡卡胺滴眼液,日本参天)对患者进行散瞳,瞳孔大于6mm时,应用A超分别采集散瞳前后眼轴长度(Axial length,AL)、晶体厚度(lens thickness,LT)、前房深度(anterior chamber depth,ACD),并计算人工晶体度数,前房拥挤率CCR(LT/ACD)、晶状体位置LP(ACD+1/2LT)、晶状体厚度眼轴长度系数等,散瞳前后测量结果的差异性分别做配对t检验或配对秩和检验。
  结果:
  散瞳前ACD的值为:2.71±0.49,散瞳后ACD的值为:2.93(2.69,3.16),t=12.5,P<0.01,差异有统计学意义;散瞳前AL的值为:23.27±0.94,散瞳后AL的值为:23.14±0.90,t=3.9558,p<0.01,差异有统计学意义;散瞳前LT的值为:4.82±0.59,散瞳后LT的值为:4.36(3.89,4.69);对散瞳前后LT的比较采用秩和检验,t=40.5,P<0.01,差异有统计学意义;散瞳前ACD/AL的值为:0.12(0.11,0.12),散瞳后ACD/AL的值为:0.13(0.12,0.14),对散瞳前后ACD/AL差异的比较采用秩和检验,t=0,P<0.01,差异有统计学意义。散瞳前LT/AL的值为:0.21±0.03,散瞳后LT/AL的值为:0.18±0.04,对散瞳前后LT/AL差异的比较采用两配对样本t检验,t=4.1079,p=0.0003,差异有统计学意义;散瞳前LT/ACD的值为:1.81(1.55,2.04),散瞳后LT/ACD的值为:1.44±0.41,对散瞳前后LT/ACD的比较采用秩和检验,t=16,P<0.01,差异有统计学意义;散瞳前目标晶体度数为:19.27±2.28D,散瞳后目标晶体度数为:20.23±2.25D,对散瞳前后目标人工晶体度数的比较采用配对样本t检验,t=4.6009,p=0.0001,差异有统计学意义。
  结论:
  1、应用睫状肌麻痹剂后,白内障患者前房深度加深、晶状体厚度变薄、眼轴变短、ACD/AL变大、LT/AL减小、LT/ACD减小。
  2、白内障患者散瞳后计算的人工晶体度数较散瞳前增加,提示测量生物学参数、计算人工晶体度数应在未散瞳情况下进行。
  3、白内障患者散瞳后可全面观察晶状体情况,提示以动态变化的角度观察白内障患者眼前节拥挤程度,排除术前可能存在的晶体不全脱位、悬韧带松弛等疾病,制定详尽的手术计划,避免出现不必要的并发症。
  4、散瞳后眼前节多个生物学参数发生改变,提示年龄相关性白内障患者仍存在残余调节力。
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