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摘要:目的 探讨miR-181b-5p在食管癌患者外周血中表达水平的变化,评价其在食管癌患者的诊断和预后评估的临床意义.方法 收集34例食管癌患者和26名健康志愿者全血标本,分为食管癌组和正常对照组;对白细胞总RNA的miRNA芯片结果进行分析;筛选单一miRNA候选指标并用RT-qPCR法进行验证.结果 与正常对照组相,比食管癌组miR-181b-5p表达水平下调.结论 miR-181b-5p在食管癌中表达下调,可能与食管癌的发生、发展相关....
摘要:目的 探讨维药异常黑胆质成熟剂在异常黑胆质型肝癌病证大鼠模型中的抗肝癌作用.方法 90只清洁级雄性Wistar大鼠按随机数字表法分成正常组、对照肝癌组、异黑肝癌组和成熟剂高、中、低剂量组6组,每组各15只.正常组正常饲养,对照肝癌组正常饲养21 d后给予二乙基亚硝胺(DEN)20周诱导肝癌.异黑肝癌组和成熟剂高、中、低剂量组大鼠通过干寒属性饲料、干寒气候环境、足底电刺激,夹尾以及强迫游泳等多因素复合作用21d建立异常黑胆质证载体动物模型,再加用DEN20周诱导建立异常黑胆质型肝癌病证模型;DEN诱导的同时,成熟剂高、中、低剂量组用异常黑胆质成熟剂按高、中、低(6.0、3.0、1.5 g/kg)剂量进行干预.提取肝组织中mRNA,利用基因芯片技术筛选出的大鼠肝脏差异表达的Id4和p21候选基因并用RT-qPCR法验证.结果 与正常组比较,对照肝癌组肝组织Id4基因表达下调(P< 0.01);与对照肝癌组比较,异黑肝癌组肝组织Id4基因表达下调(P< 0.01);与异黑肝癌组相比,成熟剂高、中、低剂量肝组织Id4基因表达均上调,其中成熟剂高、中剂量组升高显著(P<0.01).与正常组相比,对照肝癌组肝组织p21基因表达上调(P<0.01);与对照肝癌组比较,异黑肝癌组肝组织p21基因表达上调(P<0.05);与异黑肝癌组相比,成熟剂高、中、低剂量肝组织p21基因表达均下调,其中成熟剂中、低剂量组下降明显(P<0.01).结论 异常黑胆质成熟剂可影响异常黑胆质型肝癌病证模型大鼠肝脏Id4和p21基因的mRNA表达水平....
摘要:目的 探讨异常黑胆质成熟剂(abnormal savda munziq,ASM)对异常黑胆质型肝癌病证大鼠模型候选基因表达水平的影响.方法 选取♂清洁Wistar大鼠随机分为6个组.联合维吾尔医学理论及二乙基亚硝胺(diethylnitrosamine,DEN)诱导建立异常黑胆质型肝癌病证大鼠模型,并用ASM高(6.0g/kg),中(3.0 g/kg),低(1.5 g/kg)不同剂量对模型组全程干预20 wk,观察肝脏组织形态学变化,并通过RT-qPCR验证表达谱芯片筛选出的部分差异表达候选基因,结果 观察肝脏组织形态学变化发现,异常黑胆质型肝癌病证模型组成癌率明显高于对照肝癌组,ASM干预组成癌率明显低于异常黑胆质型肝癌病证模型组;芯片结果显示,与对照肝癌组比较,异常黑胆质型肝癌病证模型组上调表达基因438种、表达下调基因451种,对从异常黑胆质型肝癌病证模型组与ASM干预组表达变化相反的11种基因中选出6种进行RT-qPCR验证,结果发现,在大部分组间mRNA表达水平有差异并具有统计学意义(P<0.01,P<0.05).结论 STAT3、CyclinD1、EGLN3、EMP1、NEFL、IGFALS基因可能是ASM抗癌的作用靶点....
生物化学与分子生物学 新疆医科大学 2017(学位年度)
摘要:目的:探讨异常黑胆质成熟剂(Abnormal Savda Munziq ASMq)对异常黑胆质型肝癌病证大鼠模型候选基因表达水平的影响及其抗肝癌作用。
  方法:(1)选取清洁雄性Wistar大鼠90只,随机分为实验组和对照组。实验组大鼠分为异常黑胆质型肝癌病证模型组(异黑肝癌组)和异常黑胆质型肝癌病证模型ASMq干预组(ASMq高剂量给药组,ASMq中剂量给药组,ASMq低剂量给药组)。对照组分为正常对照组和对照肝癌组。按照维吾尔医学理论,在干寒环境采用干寒属性饲料并引用间断足底电刺激,游泳,制动,夹尾等多因素复合作用,并使用二乙基亚硝胺(Diethylnitrosamine DEN)诱导建立异常黑胆质型肝癌病证载体大鼠模型,并用ASMq高(6.0 g/kg),中(3.0 g/kg),低(1.5 g/kg)不同剂量对模型组全程干预20周,观察肝脏组织形态学变化;(2)通过全基因组表达谱研究筛选差异表达候选基因;(3)选择候选基因,设计mRNA序列特异性引物,应用RT-qPCR分析方法对六组大鼠肝脏组织 mRNA表达水平进行分析;(4)免疫组织化学和Western-blotting实验分析STAT3,CyclinD1基因蛋白含量变化和STAT3蛋白的磷酸化程度。
  结果:(1)观察肝脏组织形态学变化显示,异常黑胆质型肝癌病证模型组成功率明显高于对照肝癌组,ASMq干预组成功率明显低于异常黑胆质型肝癌病证模型组。(2)全基因组表达谱结果显示,与正常对照组比较,对照肝癌组上调表达基因1964个,下调表达基因359个;与对照肝癌组比较,异黑肝癌组上调表达基因438个,表达下调基因451个;与异黑肝癌组比较ASMq高剂量组上调基因251个,下调表达基因396个;与异黑肝癌组比较ASMq中剂量组上调基因417个,下调表达基因386个;与异黑肝癌组比较ASMq低剂量组上调基因201个,下调表达基因343个;异黑肝癌模型候选差异表达基因与ASMq作用相关候选差异表达基因相比较,有11种共性候选基因,其表达水平变化趋势正好相反。因此,选择STAT3(信号转导与转录激活因子3),CyclinD1(细胞周期蛋白D1),EGLN3(脯氨酸羟化酶3),EMP1(上皮膜蛋白1),NEFL(神经丝轻链多肽),IGFALS(胰岛素样生长因子酸不稳定亚基)等6种候选共性基因。其中STAT3,CyclinD1, EGLN3,EMP1,NEFL基因表达上调,IGFALS基因表达下调。(3)通过RT-qPCR分析,验证了上述基因芯片结果数据的准确度和特异性。正常对照组与异黑肝癌组相比较,肿瘤组织内STAT3,CyclinD1,EGLN3等基因的转录表达水平明显升高(P<0.05),EMP1,NEFL,IGFALS等基因表达水平明显降低(P<0.05)。与异黑肝癌组相比较ASMq药物干预组STAT3,CyclinD1,EGLN3等基因的转录表达水平明显降低(P<0.05),而EMP1,NEFL,IGFALS等基因表达水平明显升高(P<0.05)。(4)免疫组织化学和Western-blotting结果证实,STAT3,CyclinD1蛋白质表达水平变化与mRNA水平一致,而且STAT3磷酸化水平在正常对照组中最低,在异黑肝癌组中最高(P<0.05),在ASMq干预组中随着ASMq剂量增加而相应降低(P<0.05),表现为剂量依赖性。
  结论:(1)动物模型肝脏组织病理切片结果显示,异常黑胆质证可促进异常黑胆质型肝癌的形成,ASMq延缓或抑制异常黑胆质证引起的肿瘤发生和发展;实现疗效。(2)异常黑胆质型肝癌形成与STAT3,CyclinD1,EGLN3,EMP1,NEFL,IGFALS等6种基因表达调控异常存在密切关系,而ASMq可能纠正或逆转。异黑肝癌引起的基因表达调控改变,其中包括信号转到水平的调节。
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