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南方医科大学
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[硕士论文] 唐凌媛
耳鼻咽喉科学 南方医科大学 2018(学位年度)
摘要:随着社会工业化的发展,人类暴露于噪声的机率在日益增加。据流行病学调查结果显示,噪声是致职业性伤害和听力致残最常见的原因,也已成为世界的七大公害之一,噪声性听力损伤(noise-induced hearing loss,NIHL)的发生率目前仍在不断增长,仅次于老年性聋,排第二位。急性声损伤(acute acoustic trauma,AAT)是指噪声暴露过程中或者暴露后立即观察到的听力改变、耳鸣耳闷等症状,它可由稳态和脉冲噪声暴露所引起。稳态噪声见于一些重型设备,环境噪声多为稳态噪声。脉冲噪声是持续时间小于0.5秒、间隔时间大于1秒的噪声,如冲压、锻锤、爆炸、枪炮射击声等,这类噪声因其声压级增长很快,因此比稳态噪声的危害更大。噪声不仅给人类的身体健康带来了危害,而且给社会造成经济负担。因此,降低和预防AAT的发生也成了当前所研究的热点和难点。
  噪声引起耳蜗的损伤包括机械性和代谢性两种机制,先发生机械性损伤,之后继发代谢性损伤。大量的研究表明AAT的发生与氧化损伤有关,活性氧(reactive oxygen species,ROS)在氧化损伤中起关键作用。耳蜗氧化状态的改变(生理情况下耳蜗内ROS的产生和清除处于动态平衡,噪声刺激下ROS急剧增加)、耳蜗血流量(cochlear blood flow,CBF)减少、毛细胞膜破坏和自由基(如ROS、活性氮)代谢的影响等,其中氧化状态的改变和耳蜗血流量减少能引起ROS的积累,ROS损伤大分子如DNA,诱发基因突变,损伤线粒体,致毛细胞功能障碍,进而引起毛细胞死亡,造成听力损失。
  红景天是多年草本植物,是传统中药,具有抗缺氧、抗氧化、抗疲劳、抗衰老等功能。红景天苷是从红景天根和茎中提取出来的成分,是红景天最有活性的成分,红景天苷是类苯基丙烷糖苷中的一种,可通过抗缺氧、抗氧化等保护机体各种细胞。
  目的:
  在噪声暴露前给予豚鼠口服诺迪康胶囊,其成分为红景天,探讨红景天对噪声所致豚鼠听力损伤的拮抗作用。
  方法:
  将40只豚鼠随机分为四组,每组10只:第1组(实验对照组),暴露于噪声,给予安慰剂淀粉片处理。第2组(实验组),噪声暴露前3天给予诺迪康胶囊处理,第1组和第2组同时暴露在相同条件的脉冲噪声中。第3组(红景天组),只给与3天诺迪康胶囊预处理,不做其他处理。第4组(生理盐水组),只给予3天生理盐水预处理,不做其他处理。用听性脑干反应(auditory brainstem response,ABR)检测不同组别豚鼠实验前后ABR听阈,用扫描电镜观察豚鼠左侧耳蜗毛细胞纤毛变化情况,用酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测右侧耳蜗缺氧诱导因子-1α(Hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)、半胱天冬酶3(caspase-3)、4-羟基壬烯酸(4-hydroxynonenal,4-HNE)的表达情况,比较实验前后豚鼠听阈的变化、耳蜗毛细胞纤毛变化情况及耳蜗中caspase-3、HIF-1α和4-HNE表达的差异。
  采用SPSS20.0版统计软件对数据行统计分析,计量资料均用(x±s)表示,运用配对样本t检验和单因素方差分析对ABR听阈值行统计学分析,耳蜗中caspase-3、HIF-1α和4-HNE水平用单因素方差分析,耳蜗中caspase-3、HIF-1α和4-HNE水平相关性用Pearson分析,组间两两比较采用LSD检验,以P<0.05为差异有统计学意义。
  结果:
  1.听阈:实验前,第1组豚鼠听阈为10.50±1.58dB,第2组豚鼠听阈为11.50±2.11dB,第3组豚鼠听阈为10.25±1.42dB,第4组豚鼠听阈为11.00±1.29dB,实验后24h,第1组豚鼠听阈为49.50±2.84dB,第2组豚鼠听阈为27.75±1.42dB,第3组豚鼠听阈为10.75±1.67dB,第4组豚鼠听阈为10.75±1.21dB。实验前,4组豚鼠听阈比较差异没有显著性(P<0.05),实验后24h,第1组与第2组豚鼠听阈比较差异有显著性(P<0.05),第3组和第4组豚鼠听阈比较差异没有显著性(P>0.05),实验前后第1组和第2组听阈相差20dB,差异有显著性(P<0.05)。
  2.耳蜗形态学变化:第1组高倍镜(2.0K)下见耳蜗外毛细胞纤毛大片缺失,第2组发现外毛细胞纤毛呈个别、散在缺失,第3组和第4组外毛细胞纤毛未见明显损伤,4组豚鼠的内毛细胞纤毛均未见缺失。
  3.耳蜗caspase-3、HIF-1α和4-HNE表达情况:
  耳蜗caspase-3含量:第1组为6.64±0.54ng/g,第2组为5.62±0.41ng/g,第3组为4.10±0.40ng/g,第4组为3.85±0.48ng/g,第1组caspase-3的表达明显高于第2组(P<0.05)、第3组(P<0.05)和第4组(P<0.05),第2组caspase-3的表达明显高于第3组(P<0.05)和第4组(P<0.05),第3组和第4组caspase-3含量比较没有统计学意义(P>0.05)。
  耳蜗HIF-1α含量:第1组为8.40±0.56ug/g,第2组为5.29±0.43ug/g,第3组为3.33±0.20ug/g,第4组为3.55±0.43ug/g,第1组HIF-1α的表达明显高于第2组(P<0.05)、第3组(P<0.05)和第4组(P<0.05),第2组HIF-1α的表达明显高于第3组(P<0.05)和第4组(P=0.001),第3组和第4组HIF-1α含量比较没有统计学意义(P>0.05)。
  耳蜗4-HNE含量:第1组为760.35±51.30ug/g,第2组为587.45±44.00ug/g,第3组为418.65±39.00ug/g,第4组为414.31±14.30ug/g。第1组4-HNE的表达明显高于第2组(P<0.05)、第3组(P<0.05)和第4组(P<0.05),第2组4-HNE的表达明显高于第3组(P<0.05)和第4组(P<0.05),第3组和第4组4-HNE含量比较没有统计学意义(P>0.05)。
  四组间caspase-3、HIF-1α和4-HNE表达有显著差异(F=24.674,P<0.05;F=90.258,P<0.05;F=51.663,P<0.05),第1组和第2组caspase-3、HIF-1α和4-HNE表达显著高于第3组和第4组(P<0.05),且第1组caspase-3、HIF-1α和4-HNE表达较第2组升高(P<0.05)。四组间caspase-3、HIF-1α和4-HNE各行相关性分析,均无显著相关性(P>0.05)。
  结论:
  红景天能显著降低脉冲噪声暴露后ABR听阈,降低耳蜗中caspase-3、HIF-1α和4-HNE的浓度,减轻耳蜗外毛细胞纤毛的缺失,从而减轻听力的损伤,其机理为红景天的抗缺氧、抗氧化作用。
摘要:目的 探讨地塞米松对开放式乳突根治术后高频感音性听力损伤的保护作用.方法 将76例(76耳)胆脂瘤巾耳炎行开放式乳突根治术患者随机分为地塞米松组和非地塞米松组,每组38例,地塞米松组术中将浸有地塞米松(5 mg/ml)的明胶海绵置于圆窗表面,术后立即静脉滴注地塞米松5 mg/50 kg,非地塞米松组术中及术后均不使用地塞米松,其余治疗相同.分别于开放式乳突根治术前和术后90天行纯音听阈检测,比较两组患者术前和术后纯音听阈的变化.结果 两组对象手术前各频率骨导听阈差异无统计学意义(P>0.05);地塞米松组术后6 kHz的骨导听阈较术前提高8.3±3.9dB,8 kHz提高11.3±5.2 dB,高频(4、6、8 kHz)平均听阈提高10.1±7.2 dB;而非地塞米松组6 kHz骨导听阈较术前提高13.7±4.6 dB,8 kHz提高25.1±5.4 dB,高频平均听阈提高19.3±9.7dB,两组患者在6 kHz(P=0.039)、8 kHz(P=0.007)和高频平均听阈(P=0.009)比较差异有统计学意义.结论 术中圆窗联合术后静脉应用地塞米松能显著减轻开放式乳突根治术后高频(6、8 kHz)感音性听力损伤;建议开放式乳突根治术后应用地塞米松,以预防手术电钻声可能导致的高频感音性听力损伤....
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