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摘要:高叶绿素是一种极为优良的农艺性状,有利于提高光合作用效率,增加产量.以芸薹属高叶绿素突变体乌塌菜为试验材料,研究调控叶绿素合成的基因DET1与乌塌菜高叶绿素含量的关系.测序结果显示,乌塌菜DET1基因全长cDNA为1 690 bp,编码535个氨基酸.与小白菜和羽衣甘蓝相比,乌塌菜DET1基因在第734~739位缺失了6个核苷酸“TGATGA”,导致乌塌菜DET1编码的蛋白质BrDET1w在第245位和第246位氨基酸处缺失了2个甲硫氨酸,其中,第245位的甲硫氨酸位于芸薹属DET1蛋白的保守位点.尽管生物信息学分析显示,乌塌菜BrDET1w的相对分子质量、等电点以及亲水性没有受到明显影响,半定量RT-PCR结果也显示,DET1基因的表达量在小白菜和乌塌菜中差别不大,但DET1基因保守位点的缺失仍可能是由于乌塌菜高叶绿素含量的原因.这一结果为乌塌菜DET1基因的后续研究奠定了基础....
摘要:Rubisco活化酶(RCA)是一种可促进和维持植物光合作用关键酶Rubisco催化活性的伴侣蛋白.为了阐明RCA基因在羽衣甘蓝中的功能特征,根据油菜Rubisco活化酶基因BnRCA的全长序列设计引物,通过RT-PCR方法从羽衣甘蓝中克隆了BnRCA的同源基因,命名为BoRCA(GenBank登录号:JX944042).序列分析表明,BoRCA基因全长1 388 bp,包括1 317 bp的开放阅读框,编码438个氨基酸.该基因与BnRCA在核苷酸和氨基酸水平上的同源性分别为99.57%和99.77%.BoRCA蛋白具有定位于叶绿体基质的N端转运肽,2个保守的ATP-binding结构域和多个磷酸化位点.多重序列比对和系统进化分析显示,BoRCA与其他植物的RCA蛋白具有较高的同源性,并属于RCA的β亚基.半定量RT-PCR表达分析表明,BoRCA基因在成熟叶中表达量最高,根和老叶中没有表达,且BoRCA基因在低温条件下的表达丰度显著低于室温.这些结果为进一步研究BoRCA基因在羽衣甘蓝光合作用中的分子调控机理奠定了基础....
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北大核心 CSTPCD CSCD AJ CA
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摘要:随着转基因技术的不断革新,更简便高效的转基因方法逐渐发展起来.通过对花序浸染法的探索和改进,采取用移液枪点滴重悬液的方式转化芥菜(雪里蕻,Brassica juncea var.crispifolia)花蕾,最终获得了转基因芥菜.同时通过对影响转化效率的蔗糖浓度、表面活性剂浓度、菌液OD600值等进行研究,发现用5%的蔗糖(W/V)+0.03%的Silwet-77(V/V)重悬农杆菌,使重悬液的菌液浓度OD600为0.8时,可以获得较高的转化效率,转化率为2.3%.该方法避免了真空操作及浸染时间的影响,使得操作更加简便,且转化周期更短,为芥菜的遗传转化提供了一种更为简便的转化方法....
[硕士论文] 周爽
环境工程 重庆大学 2016(学位年度)
摘要:我国正面临水资源短缺,且随着城市化进程的加快,城市内涝频发和初期雨水污染问题日益突出,如何降低城市内涝,实现海绵城市建设,加大雨水利用率成为当今研究热点。国家主席习近平总书记在《中央城镇化工作会议》讲话中强调要提升城市排水系统时要优先考虑把有限的雨水留下来,优先考虑更多利用自然力量排水,建设自然存积、自然渗透、自然净化的海绵城市。随后,国家住房城乡建设部颁发《海绵城市建设技术指南》,根据该指南海绵城市的定义为通过渗、滞、蓄、净、用、排等多种生态化技术,构建低影响开发雨水系统,让城市变得像海绵一样,下大雨的时候,雨水能够很好地下渗、滞留、存蓄,留下的雨水还能够得到净化处理,实现有效利用。目前国内部分城市在生态排水和雨水资源化利用方面进行研究、摸索,例如北京和一些沿海发达城市开展了生态排水和雨水利用工程,取得少量工程实践,然而内陆山地城市对生态排水和雨水资源利用的研究还处于空白,因此有必要对山地海绵城市建设进行研究,本文研究方向为山地海绵城市道路低影响开发。
  本文对国内外生态排水和雨水利用工程情况进行了综述和分析,以重庆市海绵城市试点区域悦来新城为例,研究道路低影响开发模式系统,分析重庆海绵城市建设的总体规划和道路低影响专项规划,结合悦来新城海绵城市建设道路工程实例,总结新建道路和改建道路的在低影响设计过程中积累的经验,取得了以下研究成果:
  (1)对于新建道路低影响开发建设,建议新建道路路幅宽度在16m以下的(含16m),污染控制容积分解到下游绿地内;路幅宽度在16m以上的,污染控制容积由道路自身分解。在重庆海绵城市试点区域悦来新城范围内,新建道路路幅宽度在16m以下的(含16m),人行道全部采用透水铺装,新建道路路幅宽度在16m以上选用生物滞留带和透水铺装。
  (2)研究重庆海绵城市试点区域悦来新城范围内新建道路低影响开发技术,总结出该区域内道路生物滞留带的布置宽度,生物滞留带与道路纵坡的关系。
  (3)研究城市绿化带内低影响开发设施应采取的必要的防渗措施,防止下渗对道路路面及路基的强度和稳定性造成破坏。
  (4)针对现状道路低影响开发改造总结出以下三点设计思路,一是可以利用现状绿化带改造成生物滞留带,二是可以利用现状雨水检查井盖改造为圆形溢水口,三是可以利用现状雨水口改造成沉砂井。
摘要:植物叶色白化是一类明显和常见的叶绿素缺失突变,在植物光合作用机理、激素生理、核-质基因组相互作用、遗传育种等理论研究和实际应用方面均具有无可替代的价值.主要综述了近年来国内外有关白化突变体与叶绿素合成的关系、影响白化的内外因素、相关基因的克隆以及克服白化的途径等方面的研究进展,旨在为深入研究植物叶色白化突变提供参考....
摘要:随着科学知识高新技术的迅猛发展,人才正成为经济增长的极其宝贵的资源,人力资源成为最积极、最活跃、最主动的生产要素,成为影响和制约着企业经济发展的最重要因素.今天社会正步人一个以知识资源为主要依托的经济时代,即"知识经济时代",开发人力资源就越发显得重要....
[博士论文] 周爽
植物学 重庆大学 2013(学位年度)
摘要:叶色突变体是一类由于叶绿素含量发生明显变化而呈现出不同叶片颜色的突变,是研究叶绿素代谢和质体发育的良好材料。叶绿素是光合作用中最主要的色素之一,对植物体非常重要,但是游离叶绿素及其前体会对植物细胞造成光氧化伤害,因此植物体进化出一系列复杂的机制来精确调控叶绿素合成过程,使其能够迅速反应于不断变化的生理生化状态以及外界环境。虽然叶绿素的生物合成过程已经研究得比较清楚,高等植物中所有的叶绿素合成关键酶也已经被鉴定了出来,但由于整个叶绿素合成调控网络的复杂性,还有很多关键的问题研究得不够深入,也无从下手。而叶色突变体中必然有叶绿素代谢过程的某一环节发生了突变,可以为我们研究叶绿素代谢调控网络提供难得的切入点。
  羽衣甘蓝白鸽和乌塌菜都是十字花科芸薹属中的叶色突变体,过去对它们突变机理的研究非常稀少,是两种很有价值的研究材料。本文以羽衣甘蓝白鸽和绿鸽,小白菜和乌塌菜为研究材料,对两种叶色突变体:羽衣甘蓝白鸽和乌塌菜进行了生物化学和分子生物学分析,主要研究结果如下:
  (1)白鸽(Brassicaoleraceavar.acephalaf.tricolor)是羽衣甘蓝中的一种温度敏感的叶色突变体,在低温条件下其中心部分会变成纯白色。绿鸽是羽衣甘蓝中的另一个品种,在低温条件下植株仍是绿色。白鸽中的叶绿素含量在低温条件下急剧减少,而绿鸽中的叶绿素含量在相同的温度条件下只是略微减少。检测了白鸽和绿鸽中的五种叶绿素前体后发现,在低温条件下,白鸽中的叶绿素合成被抑制在Pchlide这一步,导致Mg-ProtoIX发生积累。定量PCR的结果显示低温条件下白鸽中叶绿素合成结构基因的表达从POR开始急剧降低,白鸽中的CISC和DBB1B明显受到低温的诱导而表达急剧增加。透射电子显微镜的结果显示生长在室温条件下的白鸽嫩叶中有正常的叶绿体,而生长在低温条件下的白鸽嫩叶中只有未分化的前质体。以上结果表明低温明显抑制了白鸽嫩叶中的质体发育,并通过下调下游的叶绿素合成结构基因的表达将白鸽中的叶绿素合成抑制在了Pchlide这一步,导致低温条件下白鸽嫩叶中的前质体未分化为叶绿体,白鸽嫩叶呈现为纯白色。一些与叶绿素积累相关的基因的表达也受此影响,特别是白鸽中的CISC和DBB1B,在低温条件下表达急剧增加。
  (2)为了更加深入的研究羽衣甘蓝白鸽中的叶绿素合成调控机制,我们对白鸽和绿鸽花瓣、花蕾、花柄和嫩叶中的叶绿素合成情况进行了分析。结果发现这两个物种不同组织中的叶绿素含量有着完全一致的趋势,即:嫩叶中的叶绿素含量最高,花柄次之,花瓣再次,花蕾中的叶绿素含量最低。定量PCR的结果显示,绿鸽叶绿素合成结构基因基本都是在嫩叶中的表达量最高,在花柄中次之,在花瓣和花蕾中的表达量较低,与其叶绿素含量是基本对应的。白鸽上游的叶绿素合成结构基因的表达模式与绿鸽明显不同,在嫩叶中的表达量明显降低;下游的叶绿素合成结构基因的表达模式则与绿鸽非常相似,都是在嫩叶中的表达量远高于其他组织。一些与叶绿素积累相关的基因的表达情况也同时进行了分析,结果发现DBB1A、DBB1B以及GUN4在羽衣甘蓝白鸽不同组织中的的表达模式与绿鸽非常相似,而DET1和CISC在羽衣甘蓝白鸽不同组织中的表达模式却与绿鸽有较大差异。DET1和CISC均与质体发育有密切关系,很有进一步研究的价值。
  (3)乌塌菜(BrassicacampestrisL.ssp.chinesis(L.)Makinovar.rosularisTsenetLee)是芸薹属中的一种高叶绿素突变体,表现为墨绿色的叶片。乌塌菜中的叶绿素含量比其同种的小白菜要高65.2%。对五种叶绿素前体进行检测后发现:小白菜和乌塌菜中的CoprogenIII含量没有明显差异,乌塌菜中的ProtoIX和Pchlide含量明显高于小白菜,而UrogenIII以及Mg-ProtoIX含量则比小白菜中略低。此外,乌塌菜中的血红素含量比小白菜中高78.13%。定量PCR的结果显示,在两个物种中HEMG2的表达没有明显差异。PPOX,ChlI,MTF,DVR,PORB和PORC在乌塌菜中的表达水平要低于小白菜中,而ChlD,ChlH,MTF,ChlP,CS和CAO则高于小白菜中。乌塌菜叶绿素合成结构基因的表达与其叶绿素及叶绿素前体含量并不是一一对应的。乌塌菜中的ChlH以及GUN4的表达水平分别是小白菜中的约1000倍和5倍。透射电子显微镜的结果显示乌塌菜叶绿体的类囊体膜系统比小白菜叶绿体发达得多,片层堆积更多,更密集。GUN4不仅是质体-细胞核信号因子,还与质体发育有关。ChlH是镁螯合酶的亚基之一,还可以作为质体-细胞核信号因子并被GUN4激活。这些结果表明乌塌菜中高表达水平的ChlH和GUN4可以一起作为质体-细胞核信号因子来调控叶绿素合成以及质体发育,可能是导致乌塌菜叶片中叶绿素含量高,类囊体膜系统高度发达的原因。
  (4)根据前面实验的结果,克隆了芸薹属植物中的一些与叶绿素积累相关的基因并进行了分析:
  在羽衣甘蓝白鸽、绿鸽和小白菜中分别获得了CISC的全长cDNA,都包含了2220bp的开放阅读框,并各自编码了739个氨基酸残基。蛋白质序列比对的结果显示,羽衣甘蓝白鸽BoCISCw和绿鸽BoCISCg的蛋白质序列是完全一致的,并且与小白菜BrCISCp以及拟南芥AtCISC具有很高的同源性。
  在羽衣甘蓝白鸽和绿鸽中分别获得了RCA的全长cDNA,都包含了1317bp的开放阅读框,并编码了438个氨基酸残基。蛋白质序列比对的结果显示,RCA基因编码的蛋白质序列在羽衣甘蓝白鸽和绿鸽中只有两个氨基酸的差异。
  在羽衣甘蓝白鸽、绿鸽、小白菜和乌塌菜中分别获得了DET1的全长cDNA,分别包含了1611bp、1611bp、1614bp和1608bp的开放阅读框,并各自编码了536、536、537和535个氨基酸残基。蛋白质序列比对的结果显示,DET1基因编码的蛋白质序列在羽衣甘蓝白鸽和绿鸽中是完全一致的,而在小白菜和乌塌菜中只有两个氨基酸的差异。
  在羽衣甘蓝白鸽、绿鸽、小白菜和乌塌菜中分别获得了GUN4的全长cDNA,分别包含了771bp、771bp、771bp和783bp的开放阅读框,并各自编码了256、256、256和260个氨基酸残基。蛋白质序列比对的结果显示,GUN4基因编码的蛋白质序列在羽衣甘蓝白鸽和绿鸽中是完全一致的,并且与小白菜BrGUN4p只有一个氨基酸的差异。而乌塌菜BrGUN4w的蛋白质序列与羽衣甘蓝BoGUN4及小白菜BrGUN4p差异较大,有7个保守氨基酸发生了突变。经生物信息学分析后发现,乌塌菜BrGUN4w的等电点、疏水性等理化性质和羽衣甘蓝BoGUN4、小白菜BrGUN4p相比,都发生了改变。尤其值得注意的是,乌塌菜BrGUN4w的磷酸化位点和三维结构都发生了明显改变。羽衣甘蓝BoGUN4和小白菜BrGUN4p都只有7个Ser磷酸化位点、5个Thr磷酸化位点和1个Tyr磷酸化位点,而乌塌菜BrGUN4w有10个Ser磷酸化位点、3个Thr磷酸化位点和1个Tyr磷酸化位点。乌塌菜BrGUN4w的三维结构也比羽衣甘蓝BoGUN4和小白菜BrGUN4p少了一个β折叠结构。这些改变可能导致了乌塌菜BrGUN4w功能的改变,在调控叶绿素合成和质体发育的过程中发挥着重要的作用。
[硕士论文] 周爽
行政管理 重庆大学 2008(学位年度)
摘要:当前全球公共管理研究的焦点是政府绩效管理,而公务员绩效考核研究又是政府绩效管理关注的重要内容。因为公务员是政府各项规章制度和行政行为的执行者,公务员的绩效水平决定着政府管理国家经济、社会和政治事务的有效性,决定着政府绩效的水平,而公务员的绩效考核则是提高公务员绩效水平的主渠道,是选拔和培养优秀行政管理人才的重要手段。尽管随着我国公务员制度的不断完善,公务员绩效考核作为公务员制度的“中枢”在逐步规范化,但毕竟刚刚起步阶段,在现实中还存在不少问题。
  乡镇公务员是我国政府公务员队伍中最基层的组成部分,直接面向我国人口最大比例的农民,直接服务于我国经济基础的农业经济。作为乡镇政权实施的主体——乡镇政府公务员执行力水平高低直接关系到党和政府在农村的方针政策的贯彻落实,直接关系到政府基层政权的稳定,乡镇公务员的绩效考核是促进公务员执行力水平持续提升的关键环节。而当前正值我国社会主义新农村建设的关键时期,乡镇政府绩效水平关系到建设新农村的进程,公务员绩效考核完善有利于提升乡镇政府绩效水平,成为我国新农村建设的关键。因此,本研究选择乡镇公务员的绩效考核的内容,无论在绩效管理理论或社会发展需求方面都具有一定的现实意义。
  本研究以 YM镇为个案实证调研,了解乡镇公务员绩效考核现状,探讨乡镇公务员绩效考核存在的问题,以及在此基础上提出完善乡镇公务绩效考核体系的建议。
  本研究综合运用管理学、统计学、经济学等方法,通过文献分析、问卷调查,归纳比较,对乡镇公务员绩效考核进行分析。其研究内容主要有三个部分:
  第一部分明确公务员、公务员绩效、公务员绩效考核的概念,分析了公务员绩效考核的原则、作用、方法,阐述了英、美、日本、新加坡等国家公务员绩效考核的做法和我国公务员绩效考核发展及研究的现状,并从国外政府公务员绩效考核中得到启示。
  第二部分对YM镇公务员绩效考核进行实证研究。通过分析现有绩效考核指标的重要性程度、绩效考核主体和类别、绩效考核结果的作用等方面对乡镇公务员绩效考核现状进行调查,并对调查获得的数据资料进行分析,发现目前乡镇公务员绩效考核存在的问题。
  第三部分提出完善乡镇公务员绩效考核的关键是建立有高效激励机制的乡镇公务员绩效考核体系:树立正确的绩效考核理念,全方位完善绩效考核指标,注重考核主体多元化,考核信息反馈沟通制度化,重视绩效考核结果运用,强化激励机制。
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