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[硕士论文] 周娟
化学 东华理工大学 2017(学位年度)
摘要:贵州是东亚喀斯特片区中心,是世界三大喀斯特集中区之一。微生物是土壤中最活跃的部分,是生态系统中能量流动和物质循环的主要推动者。而放线菌主要存在于土壤中,放线菌能够产生大量的具有生物活性的次级代谢产物,因此对土壤放线菌的研究具有重要的价值。贵州喀斯特区域土壤放线菌资料目前还非常有限,亟需进行深入细致的研究。本研究采用不同的分离方法对贵州万峰林国家地质公园、草海国家自然保护区、双河洞国家地质公园等8个地区的土壤放线菌进行分离和鉴定,对其多样性进行研究,并对分离得到的菌株进行抑菌活性的研究。
  具体实验结果如下:
  1.采用四种不同的方式预处理来处理106份土壤样品,其中用微波干热法的效果最佳。最终获得了76株放线菌。
  2.采用9种培养基对放线菌进行分离培养,用LNMS分离出来的放线菌数量最多为每克土5.2×105株。燕麦琼胶培养基分离出的放线菌种类数最多,为8种。
  3.在不同地区、不同植被类型的土壤分离中,耕地中分离出的放线菌数量最多可达4.65×105个/克土。
  4.在不同生境中,草海的边坡、黄果树林下和双河洞的洞穴的土壤中分离出的放线菌所占比重都在65%以上,在小生境中沟边放线菌种类比重最小为49%,而洞穴放线菌种类所占比重最大为76%。
  5.在高海拔2400 m时放线菌的种类数量减少,但稀有放线菌的数量有所增加,分别有罗氏菌属、类诺卡氏菌属等。
  6.采用滤纸片法对放线菌进行抑菌活性测定。有10株放线菌对大肠埃希氏菌和金黄色葡萄杆菌的抑菌直径达到了10mm以上,其中3菌株对金黄色葡萄杆菌的抑菌直径都在14mm以上。有12株放线菌对真菌的拮抗性较强,然后用生长速率法进行活性复筛。至少对2种真菌有明显的抑制作用。综合抑细菌实验和抑真菌实验的结果可知,C1、E4这两株放线菌对细菌和真菌均有很好的抑制作用,有继续开发的价值。
  7.通过对菌株的形态学特征、培养特征和16S rDNA序列分析,可将拮抗性优良的菌株1030、1051、1112、1095、1312归属于链霉菌属。
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