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摘要:心肌梗塞是由于心肌持久而严重的缺血所引起的部分心肌缺血坏死,传统的药物治疗、溶栓治疗和介入治疗虽能一定程度上恢复受损动脉的灌注能力,改善心肌缺血症状,却不能修复已坏死的心肌组织,从根本上治疗心肌梗塞.心肌再生无疑是解决以上临床问题的最佳方案.本文简述目前治疗心肌梗塞的几种方案,重点讨论利用心肌再生技术治疗心肌梗塞的新策略....
[期刊论文] 周军媚 吴秀山
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CSTPCD 北大核心
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摘要:MAPK信号传导途径是存在于真核细胞中的最广泛的一种调节机制,它与心血管的发育、心肌肥大等心脏疾病的发生有着密切的关系.利用荧光素酶的活性分析讨论人hole基因在MAPK信号途径中的作用.实验表明,COS-7细胞中过表达hole蛋白能够强烈抑制MAPK信号途径的2个下游转录因子AP-1和SRE的转录活性.hole的突变体报道基因分析表明,hole基因可能是通过其N′端的ERK结合区和C′端的多聚脯氨酸序列来行使其抑制作用的.研究表明,该基因可能通过参与MAPK信号途径而在心脏发育的过程中起作用....
摘要:人类KLHL31基因是本实验室已克隆的基因,其蛋白质含有保守的BTB和串连重复的Kelch结构域,实验表明人类KLHL31在成体骨骼肌和心肌组织中特异表达,KLHL31蛋白的过表达可以抑制了AP-1与SRE的活性.本文拟利用阳离子聚合物转染技术将重组表达质粒pCMV-tag2B-KLHL31转染H9c2细胞,通过G418筛选,RT-PCR和Western blotting验证,建立稳定过表达KLHL31基因的细胞系H9c2- KLHL31,为研究KLHL31在心脏发育及其相关功能提供有用的细胞研究模型....
摘要:心力衰竭已经成为人类健康的杀手,其发病机制有待阐明.wg基因直接调控心脏前体细胞的形成和特化过程,但其是否参与心力衰竭发生的过程尚不得而知.利用心力衰竭果蝇模型研究基因wg与心力衰竭的关系,结果表明两个wg基因突变杂合子的心力衰竭率分别高达52%和43%,而野生型对照组仅为25%,统计学分析差异显著,表明wg可能与心力衰竭的发生有关....
摘要:目的:以人类心肌特异性表达基因TMEM121为研究部对象,对其编码蛋白的结构和功能进行预测.方法:利用生物信息学方法对TMEM121蛋白的同源度、二级结构、互作蛋白及功能等进行预测分析.结果:TMEM121蛋白在进化上高度保守,与猩猩、绿猴、家猫、大鼠及小鼠等的同源度高达96%以上,主要二级结构是α螺旋,无信号肽,定位于内质网的可能性比较大,具有转运及信号转导等功能.结论:人类TMEM121基因可能作为转运和信号转导因子与其他蛋白共同作用参与成体心脏功能的调控....
摘要:目的 心血管疾病与心脏心律失常和心功能衰竭有关,筛选心功能衰竭相关基因能为深入阐明人类心血管疾病的发病机制奠定基础.果蝇是经典的模式动物,通过心功能衰竭果蝇模型来大规模筛选果蝇不同染色体上与心功能衰竭发生相关的基因,利用该模型结合生物统计学分析方法研究了果蝇第1号染色体上53个缺失系与心功能衰竭发生的关系,鉴定出9个缺失系有比较显著的心功能衰竭现象,表明它们与心功能衰竭的发生有关....
摘要:利用RNA干扰技术构建PYGO1基因RNA干扰(RNAi)的真核表达质粒(pSUPER -PYGO1).首先,针对 PYGO1 cDNA序列设计并化学合成一对编码短发夹RNA序列,经退火插入到由BglⅡ和XhoⅠ酶切的pSUPER 质粒上构建重组RNAi质粒pSUPER-PYGO1.通过XbaⅠ酶切鉴定及测序分析验证构建效果,将正确构建的质粒转染大鼠心肌细胞系H9c2建立产生逆转录病毒的细胞克隆.通过RT-PCR和Western blot检测pSUPER-PYGO1对H9c2细胞中PYGO1 mRNA和PYGO1蛋白的干扰效果.pSUPER-PYGO1质粒经酶切鉴定及测序分析,发现59nt寡核苷酸成功插入到预计位点,且序列完全一致;RT-PCR和Western blot检测结果显示转染 pSUPER-PYGO1的细胞中PYGO1 mRNA和PYGO1蛋白量明显降低.因此,靶向PYGO1的 pSUPER RNAi 载体构建成功,为进一步从分子水平探讨PYGO1在心脏发育中的功能奠定了基础....
摘要:odd是一个新发现的心脏特异表达基因.为了进一步研究odd在心脏发育中的功能,根据已报道的odd基因序列,以果蝇cDNA文库为模板进行PCR扩增,将所得的odd部分编码区序列连接到pET-28a载体上构建原核表达载体;重组子经酶切测序鉴定后,转化到大肠杆菌BL21菌株,IPTG诱导融合蛋白表达,Ni-IDA凝胶柱亲和纯化,纯化后的His-odd融合蛋白免疫新西兰大白兔以制备多克隆抗体,Western Blot检测抗体活性.结果表明,获得了odd原核表达重组融合蛋白以及高效价的、特异性兔抗Odd多克隆抗体,为后续的odd功能研究奠定了基础....
摘要:先天性心脏病(先心病)是新生儿第一大出生缺陷,其中主因素有遗传因素、环境因素,但更多的是两者的相互作用.诱发先心病发生的环境因素复杂多样,但是具体的致病机制还有待阐明.研究表明孕母体早期感染流感病毒后,胎儿出现心血管畸形的概率显著增加,但其分子机制尚不明确.为了揭示流感病毒宫内感染和先天性心脏缺陷之间的关系,本实验利用F344大鼠建立了流感病毒宫内感染的动物模型,观察了感染流感病毒后孕鼠胚胎的发育,并利用荧光定量PCR检测了调控大鼠胚胎心脏发育的关键基因的表达.结果 表明,流感病毒感染孕鼠后延迟鼠的胚胎发育,导致胚胎心脏发育异常.同时,胚胎心脏发育的关键基因骨形成蛋白4 (bone morphogenetic protein4,BMP4)、成纤维细胞生长因子12 (fibroblast growth factor 12,FGF12)、包含氧化还原酶的WW域(W W domain-containing oxidoreductase,WWOX)、盘状结构域受体2(discoidin domain-containing receptor 2,DDR2)扣乙型肾上腺素受体3 (Ephrin type-B receptor3,EPHB3)的表达下调,且均具有统计学差异.本研究初步证明流感病毒可能通过抑制胚胎心脏发育相关基因的表达,影响胚胎心脏发育过程,致使先心痛的发生....
摘要:ASB11参与胚胎神经祖细胞的发育、再生性肌发生以及泛素化等过程,但其机制仍不清楚.为了进一步研究斑马鱼Asb11基因的作用机制,本研究采用DNA免疫技术制备了ASB11多克隆抗体;利用斑马鱼Asb11的cDNA构建pCAGGS-P7/ASB11重组表达质粒,肌肉注射入6-8周龄的BALB/c小鼠体内,诱导抗原蛋白的表达和免疫应答的发生.结果显示,制备的pCAGGS-P7/ASB11重组质粒具有较好的免疫原性;将提取的抗血清进行Western-blot和免疫荧光检测,显示所制备的多克隆抗体抗体效价为1:400,抗血清抗体能特异的结合ASB11蛋白.本研究为后续的功能研究奠定了基础....
摘要:为证实心脏中存在一系列特异性表达基因,对细胞增殖发挥着禁锢作用,依据细胞的全能性,这些基因存在抑制癌细胞增殖的可能,将心脏特异性高表达基因LRRC10作为肺癌中的候选因子,首先利用COSMIC网站对LRRC10基因进行生物信息学、生物统计学分析,其次采用细胞流式分析LRRC10基因过表达A549后细胞的周期和凋亡情况.结果显示:LRRC10基因在多个肺癌病人中存有错义突变、拷贝数增加和表达上调的现象.A549细胞中过表达LRRC10基因后,基本不影响细胞周期,但表现出促进A549细胞凋亡的趋势.结果提示心脏特异性基因LRRC10的上调可能通过调节癌细胞凋亡参与肺癌的发生.这为心脏特异性基因在肺癌细胞凋亡中的作用提供了实验证据....
摘要:果蝇心脏位于身体背部,是一个体节性重复的线性管状结构.在hedgehog(hh)基因的信号诱导下,seven-up(svp)基因调控果蝇的心脏发育,在每个体节的两个心肌细胞和两个副心肌细胞中表达.结果表明,在svp纯合突变体中,报告基因lacZ在心肌细胞中的表达图式正常,但在副心肌细胞中的表达图型明显异常,而且部分EPC细胞生长尺寸增加.某些体节的DA1肌肉祖细胞缺失,晚期突变体胚胎体壁肌肉细胞也呈现异常,表明基因svp的活性对果蝇副心肌细胞、DA1肌肉祖细胞和体壁肌肉细胞的分化是必须的,并且可能与EPC副心肌细胞的尺寸生长有关....
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