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摘要:近几年来,猪群感染呼吸系统疾病比较严重,使得猪群饲料利用率降低,日增重达不到标准,猪出栏时间推迟、药物的费用增加等,有的甚至造成相当数量的猪只死亡....
摘要:猪传染性胸膜肺炎(Porcine pleuro pneumonia)是由胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuro pneumoni-ae,APP)引起以肺出血、坏死和纤维素性渗出为主要病变的接触性传染病,该病由Pattison等1957年首次报道.在欧洲、美国、加拿大、日本、韩国、澳大利亚等地都曾经发生过此病[1]....
摘要:猪传染性胸膜肺炎(Porcine pleuropneumonia)是由胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)引起以肺出血、坏死和纤维素性渗出为主要病变的接触性传染病,该病由Pattison等1957年首次报道.在欧洲、美国、加拿大、日本、韩国、澳大利亚等地都曾经发生过此病.我国近年来大部分地区都有对该病的报道,哈尔滨兽医研究所于1987年发现临诊病例,并通过病原分离鉴定、人工复制病变及血清学检查等,证明APP在我国的存在和流行.杨旭夫于1990年对此进行了首次报道....
摘要:近年来,国内外许多猪场出现了一种以多发性浆膜炎和关节炎及高死亡率为特征,严重危害仔猪和青年猪的传染病,给养猪业带来巨大的经济损失.经细菌分离培养、生化鉴定和分子生物学试验研究表明,该传染病主要是由副猪嗜血杆菌(Hps)所引起.为了更加全面地本质地认识该病原体,本文对其流性病学、理化特性、分子生物学、诊断及防制作了较为全面的综述....
摘要:2003年是疾病多发的一年,主要是由于猪圆环病毒病、蓝耳病和副猪嗜血杆菌病等新病的爆发,而且下半年饲料的主要原料玉米霉变,给养殖户带来很大的损失.本文根据病毒室全年的检测情况,对发病的主要情况进行统计分析,供大家参考....
摘要:目的克隆乙型脑炎病毒E基因并在大肠杆菌中进行表达,为今后研制乙脑分子诊断试剂盒和基因工程疫苗奠定基础.方法根据乙型脑炎病毒株SA14-14-2E基因的序列设计一对引物,采用RT-PCR技术扩增其E基因全长cDNA,将扩增产物克隆到pBlusecriptIISK(+)载体中,然后亚克隆到原核表达载体PGEX-KG中,筛选重组质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3)表达重组蛋白.结果与结论获得了含全长乙型脑炎病毒E基因的重组质粒,经酶切和测序证实构建正确.表达的目的蛋白经SDS-PAGE和Western blot分析证实确为乙型脑炎病毒E蛋白且有生物学活性....
摘要:传染性萎缩性鼻炎是养猪业中的一种重要的呼吸道传染病,产毒素多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida)是其重要的病原之一,外膜蛋白H(OmpH)在该菌的致病和免疫中发挥重要作用.以产毒素多杀性巴氏杆菌血清D型菌株HN-13基因组为模板,扩增了ompH基因1 020bp编码区,经过序列测定和生物信息学分析,发现OmpH蛋白具有典型的膜通道蛋白的特征.将ompH基因克隆到原核表达载体pET-28a中构建了重组表达质粒pET-ompH,转化大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3),经IPTG诱导,实现了高效表达,表达产物主要以包涵体的形式存在.用纯化的重组蛋白免疫家兔制备OmpH的抗血清,Western杂交显示抗血清能够与菌体蛋白发生特异性反应.以重组OmpH为包被抗原建立了间接ELISA方法,方阵滴定确定最佳抗原包被浓度为2.89μg/mL,用56份参考阴性猪血清确定阴阳界限值为0.36(OD630).用建立的ELISA方法对192份临床猪血清样品进行检测,结果显示OmpH抗体阳性率为51.6%(99/192),阴性率为48.4%(93/192).研究为OmpH的进一步应用奠定了基础....
摘要:利用14个血清型的胸膜肺炎放线杆菌的标准菌株制备诊断抗原,通过玻片凝集试验,琼脂扩散试验和对流免疫电泳,以标准抗血清作为参考,检验各种诊断抗原的灵敏性和特异性.分别用凝集抗原、超声波处理抗原和酚水抗原对来自湖北、湖南、江西、河南、安徽5省猪场的155份送检血清进行检测.结果表明可以对送检血清快速、准确地进行鉴别诊断和血清分型....
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北大核心 CSTPCD CSCD CBST
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摘要:动物产品安全是当今全世界高度关注的热点问题.在论证我国加强动物疫病应急体系建设的重要性基础上,深入剖析我国动物疫情防控存在的突出问题:借鉴发达国家的经验,提出我国公共危机下动物疫病应急反应体系建设的思路与措施:设置专门机构,科学制定应急方案,积极应对动物疫病公共风险;加强疫病监控,科学安排扑灭计划;建立一只精干、高效的动物疫病应急体系专业队伍:完善赔偿制度,保障动物疫情应急处理;加强动物出入境检疫和风险评估,有效防范境外疫情....
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北大核心 CSTPCD CSCD AJ CA CBST
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摘要:研究了猪胸膜肺炎放线杆菌毒素Ⅰ重组表达蛋白(包括粗提包涵体和经复性处理的重组蛋白)对小鼠的急性毒性以及免疫保护性,并和天然毒素Ⅰ(由APP血清10型菌的培养物上清提取)做了对比.在急性毒性试验中,3种蛋白均以200μg/只的剂量腹腔注射小鼠,并分别于24h、7d和14d后眼眶放血致死,检测血常规和血液生化相关指标.结果表明,3种蛋白均不引起小鼠死亡,且重组表达蛋白对小鼠的生长、血常规和血液生化指标没有显著影响.在免疫保护性试验中,用3种蛋白乳化后免疫小鼠,2周后加强免疫1次,并在每次免疫后采血检测其效价,二免2周后用致死剂量的APP血清10型菌(1.09×108 cfu)腹腔攻毒.结果表明,天然毒素和复性的重组表达蛋白均具有良好的免疫原性,对小鼠具有较好的免疫保护效力....
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北大核心 CSTPCD CSCD CA CBST
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摘要:本试验旨在建立一种针对猪圆环病毒2型(PCV2)和猪肺炎支原体(Mhp)的双重PCR检测方法.对猪伪狂犬病毒(PRV)、猪细小病毒(PPV)、沙门菌、大肠杆菌、猪链球菌、副猪嗜血杆菌、巴氏杆菌、支气管败血波氏杆菌基因组模板进行PCR特异性检测,没有任何非特异性扩增.敏感性试验显示,建立的PCR检测方法能够检测到的PCV2和Mhp模板的最低浓度分别为130和180fg·mL-1.同时用单项PCR和双重PCR对湖北省的各大猪场的174份PRDC样品进行检测,PCV2和Mhp的符合率分别达到100%和98.28%.进一步应用双重PCR调查PCV2和Mhp在不同猪场的感染动态,结果显示有一定比例的仔猪在产房就已经感染PCV2和Mhp,大部分猪是在保育和育肥阶段被感染 ;但是不同猪场表现出不同的感染动态.本试验建立了一种针对PCV2和Mhp的双重PCR检测方法,具有良好的特异性、敏感性,为临床疾病检测和疾病流行态势调查提供了有力的支持....
摘要:猪瘟和猪伪狂犬病是猪的两种重要病毒性传染病,是影响生猪生产最为严重的两大猪传染性疾病。多年来,国内外对其进行了广泛研究,包括疫苗、诊断方法、发病机制、临床症状和防控措施等。目前,针对两病的防控方案多样。但是在实际工作中尤其是在这两种病的净化方面有待更多的探讨与研究。本研究不仅集成配套猪瘟及猪伪狂犬病防控技术,包括疫苗筛选、诊断方法研制与配套等,而且将各种防控技术运用于规模化猪场,配合生产流程,进行有效示范。通过几年的工作开展,已取得了一些经验,掌握了部分猪场猪瘟及猪伪狂犬病防控与净化的临床资料,并在部分猪场的种猪群初步实现了集成与示范,为示范场带来了切实的经济效益。
摘要:本研究对黄冈、宜昌两个规模化奶牛场(500头、800头)采集患临床型乳房炎、隐形乳房炎和健康奶牛奶样共99份,进行了细菌分离与鉴定,对分离鉴定出的金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、无乳链球菌、停乳链球菌、乳房链球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、变形杆菌的16SrRNA基因进行扩增及测序,并将测序结果与NCBI数据库进行比对.采用K-B纸片法对鉴定的细菌进行了药敏试验.结果表明,从99份奶样中分离到的细菌有8种共100株,未分离出细菌奶样10份,99份奶样细菌检出率为89.9%,其中金黄色葡萄球菌26株(26.26%)、表皮葡萄球菌23株(2 3.23%)、无乳链球菌13株(13.13%)、停乳链球菌10株(10.1%)、乳房链球菌6株(6.0%)、大肠杆菌16株(13.13%)、变形杆菌5株(5.0%)、绿脓杆菌4株(4.0%).通过对分离鉴定出的8种病原菌的16SrRNA基因扩增、测序、比对,结果表明通过鉴别培养基、革兰氏染色及生化鉴定出的细菌种属结果相一致.细菌药敏试验结果表明,先锋霉素IV、诺氟沙星、氧氟沙星对两个规模化奶牛场各种乳房炎的致病菌均较敏感,而各种致病菌对青霉素、链霉素完全耐药或者是极不敏感.
摘要:副猪嗜血杆菌病又名猪多发性浆膜炎与关节炎或称革拉瑟氏病(Glǎsser's Disease )。该病仅发生于猪常见于5周龄到8周龄的保育猪但从2周龄的哺乳仔猪到4月龄的育肥猪均可感染和发病。本文介绍了副猪嗜血杆菌病的病原、流行病学、临床症状与病理变化提出诊断和防治措施。
摘要:支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica,Bb)是一种在临床上引起猪萎缩性鼻炎以及支气管肺炎的重要病原菌,也能和其他病原菌混合感染,诱发猪群呼吸道疾病综合症(porcine respiratory disease complex,PRDC),给养猪业造成巨大的危害;细菌的aroA基因编码5-烯醇丙酮酰莽草酸-3-磷酸合成酶的合成,该酶对于细菌芳香族氨基酸等芳香族化合物的合成代谢具有十分重要的意义,该基因缺失后会阻断细菌体内的芳香族生物合成途径,使得细菌在宿主体内的增值能力减弱,从而使其毒力降低。本文将就本实验室对于波氏杆菌aroA基因的缺失以及基于该缺失株作为载体表达异源基因的研究情况作一个简单的介绍,为研制波氏杆菌弱毒疫苗和重组疫苗奠定基础。
摘要:为了调查规模化猪场猪伪狂犬病野毒感染情况本研究将湖北省7个规模化种猪场作为研究对象详细了解各场的免疫方案并将猪群分为经产母猪、种公猪、后备母猪、哺乳仔猪(0-30日龄)、保育仔猪(31-60日龄)、生长猪(61日龄以上)按各猪群5[%].8[%]的比例采血检测PR野毒gE抗体。结果表明1447份血清中野毒gE抗体阳性率为8.98[%]。将不同猪群比较分析保育仔猪至生长猪阶段的猪伪狂犬病gE抗体阳性率上升最快。本研究继续探索了一个规模化猪场的仔猪PR母源抗体消退规律分别设置了30日龄、44日龄、56日龄、70日龄免疫组于免疫后1周、2周及4周采血检测PR抗体滴度结果表明该场使用该疫苗的最佳首免时间为44.56日龄。本研究的开展为规模化猪场评估PR的感染现状制订合理的PR免疫方案提供参考。
摘要:本文首先介绍了示范猪场的背景其次介绍了猪瘟病毒以及猪瘟抗体的检测方法;示范场猪瘟免疫状况调查示范场猪瘟免疫方案优化等猪瘟净化相关技术然后介绍了示范猪场猪瘟带毒猪只的检出与剔除介绍了净化猪群建立后的监测和评估及净化猪群的维持。
摘要:巴氏杆菌(Pasteurella multocida,Pm)是一种人兽共患病原微生物,其可对多种畜禽及人具有一定的致病性,该菌在世界范围内广泛存在并传播流行,造成严重的经济损失.2001年巴氏杆菌Pm70株全基因组序列首次公布,现陆续有十几株序列的草图已被提交,但完整序列的公布并不多,而如能结合该菌的全基因组序列,从基因组水平角度解释Pm的致病机制,将可更加全面的分析该菌的遗传变异规律及致病因子.本文通过对我们测序的D型产毒素巴氏杆菌HN06株及A型巴氏杆菌HB03株基因组序列进行了基因组学分析并结合其他巴氏杆菌基因组序列,开展该菌的比较基因组学研究,旨在为阐述其起源及基因组特征,论述其基因组进化和比较基因组学的研究提供参考.
摘要:肠外致病性大肠杆菌是一种重要的人兽共患病原和食源性病原近年来日益受到关注.TolC是革兰氏阴性菌广泛存在的一种保守外膜通道蛋白本研究以猪源ExPEC 042野生株、tolC基因突变株及其回复补偿株作为试验菌株探讨了TolC对ExPEC耐药性和生物膜形成能力的影响.结果显示:(1) tolC基因突变后可逆转野生株对多种抗菌药物的耐受性而回复补偿株可恢复这种多重耐药性证实TolC与ExPEC多重耐药性密切相关;(2)结晶紫实验和扫描电镜实验表明tolC基因突变严重影响细菌的生物膜形成能力刚果红实验和荧光白实验证实tolC基因突变减少卷曲菌毛的形成而增加纤维素的形成证实TolC与ExPEC生物膜形成密切相关且与生物膜两种主要胞外基质成分卷曲菌毛和纤维素的产生有密切联系.
摘要:利用实验室研制成功的猪瘟E2蛋白单克隆抗体,以异硫氰酸荧光素(FITC)为标记物,通过透析法进行标记.利用标记单抗建立直接免疫荧光检测猪瘟病毒抗原的方法,并开展了该方法的抗体使用最佳稀释度、特异性、重复性、敏感性等方面的研究,同时运用冰冻切片技术处理组织病料后检测,与目前实验室检测常用的RT-PCR方法对84份临床病料进行同步检测,结果显示该检测方法与RT-PCR方法的符合率达83.9%,直接免疫荧光检测方法具有快速特异性强,并能准确对病原进行定位等特点,可以用于临床初步检测以及猪瘟病毒在组织内增殖动力学研究.
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