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[专利] 发明专利 CN201610330333.X
摘要:本发明涉及PD0325901在维持动脉导管开放中的应用。在乳鼠出生前或出生后给予注射PD0325901,乳鼠动脉导管均能维持开放;实验结果显示PD0325901主要通过以下三个机制来维持DA开放:抑制DASMC增殖,减少迁移和抑制胞内钙浓度,说明PD0325901可用于制备维持动脉导管的药物或试剂。
[专利] 发明专利 CN201410723762.4
摘要:本发明涉及NCX1和NCKX4作为诊断动脉导管闭合或开放的标志物。本发明通过western blot、Qrt-PCR和免疫荧光三种方法对动脉导管闭合及开放的患者进行了蛋白表达差异的分析,首次证明NCX1、NCKX4蛋白在人动脉导管组织中表达,并且这些蛋白在闭合和开放的两组动脉导管组织中的相对表达量具有明显的差异,可能是调控动脉导管闭合或开放的关键因子,可用于动脉导管未闭的临床诊断,且诊断的准确度高。
[专利] 发明专利 CN201410723729.1
摘要:本发明涉及ARHGAP26作为诊断动脉导管闭合或开放的标志物。本发明用ITRAQ蛋白质组学的方法对开放和闭合的人动脉导管组织进行鉴定分析,筛选出132个有差异的蛋白,进行信号通路分析后,挑选ARHGAP26蛋白,用Western Blot、Qrt-PCR和免疫组化三种方法进行了鉴定,首次证明该蛋白在人动脉导管组织中表达,并且该蛋白在闭合和开放的两组动脉导管组织具有明显的差异,可能是调控动脉导管闭合或开放的关键因子,可用于动脉导管未闭的临床诊断,且诊断的准确度高。
[专利] 发明专利 CN201410723475.3
摘要:本发明涉及SCN3A作为诊断动脉导管闭合或开放的标志物。本发明用ITRAQ蛋白质组学的方法对开放和闭合的人动脉导管组织进行鉴定分析,筛选出132个有差异的蛋白,进行信号通路分析后,挑选SCN3A蛋白,用Western Blot、Qrt-PCR和免疫组化三种方法进行了鉴定,首次证明该蛋白在人动脉导管组织中表达,并且该蛋白在闭合和开放的两组动脉导管组织具有明显的差异,可能是调控动脉导管闭合或开放的关键因子,可用于动脉导管未闭的临床诊断,且诊断的准确度高。
[专利] 发明专利 CN201410723745.0
摘要:本发明涉及MYO1D作为诊断动脉导管闭合或开放的标志物。本发明用ITRAQ蛋白质组学的方法对开放和闭合的人动脉导管组织进行鉴定分析,筛选出132个有差异的蛋白,进行信号通路分析后,挑选MYO1D蛋白,用western blot、Qrt-PCR和免疫组化三种方法进行了鉴定,首次证明该蛋白在人动脉导管组织中表达,并且该蛋白在闭合和开放的两组动脉导管组织具有明显的差异,可能是调控动脉导管闭合或开放的关键因子,可用于动脉导管未闭的临床诊断,且诊断的准确度高。
[专利] 发明专利 CN201410723743.1
摘要:本发明涉及MAP2K1作为诊断动脉导管闭合或开放的标志物。本发明用ITRAQ蛋白质组学的方法对开放和闭合的人动脉导管组织进行鉴定分析,筛选出132个有差异的蛋白,进行信号通路分析后,挑选MAP2K1蛋白,用western blot、Qrt-PCR和免疫荧光分析三种方法进行了鉴定,首次证明该蛋白在人动脉导管组织中表达,并且该蛋白在闭合和开放的两组动脉导管组织具有明显的差异,可能是调控动脉导管闭合或开放的关键因子,可用于动脉导管未闭的临床诊断,且诊断的准确度高。
[博士论文] 叶霖财
儿科学(心胸外科) 上海交通大学 2016(学位年度)
摘要:研究背景和目的:0-12月的婴儿期是出生后心脏发育的关键时期。这段时期内,婴儿心脏的结构和功能发生了快速的变化,外在表现为心率从150次/分钟减慢为80次/分钟,而收缩压则从55mmHg上升到100mmHg。死于先天性心脏病的患儿55.3%是发生在这段时期并且绝大部分复杂先天性心脏病(如大动脉错位、肺动脉闭锁等)需要在新生儿或婴儿早期手术。心肌细胞增殖关系到心脏的发育和手术后心脏的修复,是目前研究的热点之一。然而,由于人体心肌组织标本的获取困难,目前对于人心肌细胞的增殖的研究仅有数篇报道,特别是对于婴儿早期心肌细胞的增殖所知更少。本研究拟收集一岁内的人心肌组织,观察人婴儿早期心肌细胞增殖的特征;并探讨调控婴儿心肌细胞增殖改变的内在机理;在上述研究的基础上,利用小分子化合物探索药物促进婴儿早期心肌细胞增殖的可能;最后研究心肌细胞增殖在先天性心脏病外科手术中的意义。
  方法:采用苏木精-伊红染色比较0-12月心肌细胞的形态学特征,利用激光共聚焦显微镜和流式细胞术观察Ki67阳性和Aurora B阳性心肌细胞的比例,明确婴儿早期心肌细胞的增殖特征。利用Western Blot、Qrt-pcr、免疫荧光和免疫组化等方法观察目前已知的关键性调控因子在人心肌细胞的表达情况;分离人心肌细胞在体外进行培养,观察添加小分子化合物后,EdU阳性和Ki67阳性心肌细胞比例的改变;对小鼠行肺动脉环缩术,超声确定环缩效果,免疫荧光检测右心室增殖的心肌细胞,Qrt-PCR检测增殖肥大相关基因的改变。
  结果:HE染色显示心肌细胞的平均体积随年龄的增加而不断加大。激光共聚焦显微镜显示0-3月,4-6月和7-12月的Ki67阳性心肌细胞的比例分别为0.55±0.02%、0.05±0.01%和0.02±0.005%,而Aurora B阳性心肌细胞的比例分别为0.12±0.02%、0.01±0.01%和0.005±0.004%;流式细胞术显示0-3月,4-6月和7-12月的Ki67阳性心肌细胞的比例分别为0.47±0.16、0.07±0.02和0.02±0.01。Western-blot,免疫荧光和免疫组化显示关键性转录因子 NICD和 YAP1表达随着年龄的推移而减少,而β-catenin的表达随年龄的增加而增加。婴儿早期心肌细胞在体外培养较易培养,小分子化合物CHIR99021可以明显促进婴儿早期心肌细胞的增殖。小鼠肺动脉环缩术后,增殖的心肌细胞明显增加并且与增殖有关的基因也明显上调。
  结论:0-3月的人心肌细胞具有十分突出的增殖能力,是婴儿早期心肌细胞的特征之一;NICD,β-catenin和 YAP1均可能参与了婴儿期心肌细胞增殖的调控;小分子化合物可用来调控早期人心肌细胞的增殖;肺动脉环缩术可使小鼠右心室发生增殖和肥大的改变,心肌细胞的增殖可能是肺动脉环缩术锻炼心室功能的机制之一。
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