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摘要:[目的]探讨葡萄糖对鹅肝细胞增殖能力的影响.[方法]以四川白鹅为供试动物,采用半原位二步胶原酶灌注法采集鹅的肝细胞,之后用含不同浓度(0(对照组,CK),5,20,35 mmol/L)葡萄糖的培养基培养鹅原代肝细胞,培养48h后用BrdU免疫荧光染色检测BrdU阳性细胞率,BrdU-ELISA法检测肝细胞DNA含量,ELISA法检测Cyclin D1蛋白质量浓度.反转录聚合酶链式反应检测细胞增殖相关基因(Cyclin D1、Cyclin D2和Cyclin D3)的mRNA表达水平.[结果]与对照组比较,20和35 mmol/L葡萄糖可以显著增加BrdU阳性细胞率,并可以明显提高原代肝细胞的DNA含量;5和20 mmol/L葡萄糖对Cyclin D1蛋白质量浓度影响不显著,而35 mmol/L葡萄糖对Cyclin D1蛋白质量浓度有显著促进作用.Cyclin D1、Cyclin D2和Cyclin D3的mRNA表达水平随着葡萄糖浓度的增加而升高,其中35 mmol/L葡萄糖的促进作用明显大于其他处理.[结论]葡萄糖能够促进鹅原代肝细胞的增殖....
[专利] 实用新型 CN201821928586.8
四川农业大学 2019-07-09
摘要:本实用新型公开了一种水禽选育用分类箱,包括箱体、过滤板、选育室、积污室和卡块,所述箱体内部的底端设有积污室,积污室内部的一侧设有动力腔体,所述动力腔体内部的中心位置处设有水泵,所述积污室的顶部设有过滤板,过滤板上方的箱体内部设有选育室,所述选育室的内部设有等间距的分类板,分类板一侧的选育室内壁两端皆设有滑槽,所述滑槽的内部设有等间距的滑块,所述箱体的上方安装有密封盖,密封盖底端的拐角位置处皆设有支柱,所述支柱顶部的两外侧壁上皆设有卡槽,所述箱体表面的一端设有控制面板。本实用新型不仅提高了分类箱使用时的便捷性,提高了分类箱使用时的选育效果,而且避免了分类箱使用时水花乱溅的问题。
[专利] 实用新型 CN201821928451.1
四川农业大学 2019-07-09
摘要:本实用新型公开了一种水禽养殖用生态循环房舍,包括储水箱、排水管、控制面板、过筛网和吸附盒,所述储水箱内部的一侧固定有排水管,所述储水箱内部的一端固定有过筛网,所述储水箱表面的中心位置处安装有控制面板,控制面板两侧的储水箱表面皆焊接有置物袋,所述储水箱的顶端安装有外壳,外壳的内部固定有等间距的隔间,所述隔间的顶端焊接有固定板,所述顶盖内部的中心位置处焊接有净化板,所述顶盖与隔间内部皆安装有通风窗口,所述换气板的内部填充有导气球体。本实用新型不仅避免房舍使用时对环境造成一系列污染,减少了房舍使用时工作人员的劳动量,而且有利于环境的清洁及疫病防控。
[硕士论文] 叶凤江
动物遗传育种与繁殖 四川农业大学 2018(学位年度)
摘要:肝脏在维持机体糖脂代谢平衡中扮演着重要角色。本研究室前期在细胞水平的研究表明,葡萄糖和果糖诱导鹅肝细胞脂质沉积的能力不同,提示不同类型糖诱导肝细胞脂质沉积能力不同。CPT1A、MTP是脂质代谢中脂肪酸氧化和脂质转运途径上起关键作用的基因。本研究以天府肉鹅母系为研究对象,克隆鹅CPT1A、MTP基因的CDS区序列,并进行生物信息学分析;采用半原位二步胶原酶灌注法分离培养鹅原代肝细胞,通过葡萄糖、果糖和蔗糖分别处理体外培养的鹅原代肝细胞并分别转染CPT1A、MTP干扰质粒,采用MTT检测细胞活力,荧光定量PCR法、Elisa试剂盒检测法以及油红O染色法检测脂肪酸合成,VLDL-TG分泌转运以及脂肪酸合成、脂肪酸氧化和脂质转运途径的相关指标来反映脂质代谢的变化,初步探讨CPT1A、MTP干扰对三种糖诱导的鹅肝细胞脂质沉积的影响,能够更为清晰的了解糖诱导肝脂质沉积的机理。主要结果如下:
  1.通过设计分段引物进行PCR扩增并拼接获得鹅CPT1A、MTP基因CDS区序列。鹅CPT1A、MTP基因的CDS区序列分别编码770、893个氨基酸。
  2.分别转染CPT1A、MTP干扰质粒24小时后,Q-PCR检测显示CPT1A、MTP干扰效率分别达51.3%、62.6%,表明CPT1A、MTP干扰鹅肝细胞成功。
  3.转染CPT1A干扰质粒后,FAS、ACCαmRNA表达量无显著变化,SREBP1mRNA表达量显著下降(P<0.05),FAS、ACCα激酶含量显著升高(P<0.05);CPT1A、ACOX1、PPARαmRNA表达量显著下降(P<0.05),CPT1A激酶含量显著降低(P<0.05);MTP、APOB、DGAT1mRNA表达量显著下降(P<0.05),MTP、APOB激酶含量无显著变化。油红O染色显示鹅肝细胞干扰CPT1A使细胞内脂滴颗粒增多,脂质沉积明显,同时细胞内外TG含量增加,而胞外VLDL含量减少。
  4.转染MTP干扰质粒后,FAS、ACCαmRNA表达量显著升高(P<0.05),SREBP1mRNA表达量显著降低(P<0.05),FAS、ACCα激酶含量显著升高(P<0.05);CPT1A、ACOX1、PPARαmRNA表达量无显著变化,CPT1A激酶含量无显著变化;MTP、APOB mRNA表达量显著降低(P<0.05),DGAT1mRNA表达量无显著变化,MTP激酶含量显著降低(P<0.05),APOB激酶含量无显著变化。油红O染色显示鹅原代肝细胞干扰MTP后,细胞内脂滴颗粒增多,脂质沉积明显,同时胞内外TG和胞内VLDL含量增加,而胞外VLDL含量减少。
  5.与单独葡萄糖或单独蔗糖处理相比,葡萄糖或蔗糖处理同时干扰CPT1A后,FAS、ACCα、SREBP-1基因表达量及FAS、ACCα蛋白激酶含量升高,CPT1A、ACOX1基因表达量降低,MTP、APOB基因表达量及MTP蛋白激酶含量降低。与单独果糖处理相比,果糖处理同时干扰CPT1A后,FAS、ACCα、SREBP-1基因表达量及FAS、ACCα蛋白激酶含量降低,CPT1A、ACOX1基因表达量降低,MTP、APOB基因表达量及MTP蛋白激酶含量降低。油红O染色显示三种糖分别处理同时干扰CPT1A使细胞内脂滴颗粒增多,脂质沉积明显,同时细胞内TG和胞内VLDL含量增加。
  6.与单独葡萄糖或蔗糖处理相比,葡萄糖或蔗糖处理同时干扰MTP后,FAS、ACCα、SREBP-1基因表达量及FAS、ACCα蛋白激酶含量升高,脂肪酸氧化途径上的重要基因表达量及其蛋白激酶含量无显著变化,MTP、APOB基因表达量及MTP蛋白激酶含量降低。与单独果糖处理相比,果糖处理同时干扰MTP后,FAS、ACCα、SREBP-1基因表达量及FAS、ACCα蛋白激酶含量降低,CPT1A、ACOX1基因表达量升高,MTP、APOB基因表达量及MTP蛋白激酶含量降低。油红O染色显示分别三种糖处理同时干扰MTP使细胞内脂滴颗粒增多,脂质沉积明显,同时细胞内外TG和胞内VLDL含量增加。
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