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摘要:自从2011年飞秒激光小切口基质透镜取出术被公开后就获得了极大的关注,它相较于之前的准分子手术,有着明显的优势。已有很多研究对它的安全性、有效性、稳定性及可预测性进行了证明,但作为一种全新的手术方式,术后效果仍有待长期观察。本文就近几年国内外对其术后视觉质量、对角膜的影响、伤口愈合及术后并发症等方面所做的中长期跟踪随访结果进行综述。
摘要:中医体系是祖国文化的瑰宝,中医的整体思想是中医理念的精髓,近几年人们的生活质量有了质的飞跃,越来越重视如何提高外貌美、形体美以及对亚健康的调摄,中医美容在这几个领域均有着广阔的空间和前景,源于中医五脏与美容有着非常紧密的联系.现从中医五脏入手,通过分析中医的藏象理论与美容的关系,探究中医传统理论潜在的美学价值,为中医美容奠定中医传统思想的基础,为中医临床提供美容保健的整体观念和治疗损容性疾病的新思路.
[硕士论文] 刘颖
药物分析学 湖北中医药大学 2017(学位年度)
摘要:人血白蛋白(Human serum albumin,HSA)是由健康人的血浆经低温乙醇分离提取并经病毒灭活后制成的生物制品,临床上用于出血性、外伤性体克、烧伤、肝硬化伴腹水和水肿、恶性肿瘤、肾病水肿等。
  目前国内企业采用低温乙醇法压滤工艺分离血浆蛋白,该工艺具有蛋白收率高,生产成本低,经济效益好,因而在工业化生产中大规模应用。然而低温乙醇法特异性不高,在生产的过程中不能完全除去杂蛋白成分,各企业的工艺参数也不尽相同,因此在终产品中会存在一定量的杂蛋白。据文献表明,制剂中存在的这些杂蛋白是引起的临床不良反应的主要原因之一[1],不良反应类型主要为全身过敏反应和多器官损坏,包括过敏性休克、热原样反应、肾脏损害等。因此探究血液制品中的未知蛋白可为临床不良反应提供参考,本课题旨在建立杂蛋白分离分析的方法并测定人血白蛋白制剂中的杂蛋白的组成,为各企业的生产工艺优化提供了数据支持,同时为产品的一致性评价奠定基础。
  为了初步了解各企业的杂蛋白含量和种类的差异,对五家企业近两年的批签发数据进行统计分析,共获得323批白蛋白制剂的纯度数据。结果显示,五家企业生产的白蛋白制剂纯度范围在96.2%~98.3%之间,企业间差异较大。其中A企业生产的制剂纯度较为均一,提示生产工艺较为稳定;B企业生产的制剂纯度较其他四所企业低,显示产品中存在一定量的未知蛋白。为了进一步分析各企业制剂的蛋白组成异同,对白蛋白制剂进行聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析,初步探究其组成成分的异同,结果显示各企业间生产的白蛋白制剂差异较小,各企业制剂的杂蛋白有8~9条带。鉴于醋酸纤维素薄膜电泳与SDS-PAGE方法的局限性,不能特异性地鉴定出杂蛋白成分,本研究尝试建立未知蛋白谱鉴定方法,进而确定各企业生产的人血白蛋白制剂的未知蛋白组成。
  在建立质谱分析方法时,首先对供试品浓度进行选择,再对质谱鉴定参数进行优化。结果显示,白蛋白浓度超过5mg/ml时,超过仪器鉴定阈值,导致白蛋白主成分未能被成功鉴定,提示蛋白浓度不能过高。蛋白浓度在1mg/ml-2mg/ml时,主成分白蛋白肽图较为完整,但未知蛋白检出效率低;对白蛋白肽图中的肽段进行b/y离子连续性分析发现,蛋白鉴定得分大于150分,结果具有较高的可信度。以上结果提示主成分蛋白浓度过高,掩盖未知蛋白的的信号,未知蛋白的鉴定需要对未知蛋白进一步分离。
  结合前期结果,对各企业的白蛋白中未知成分进行分离纯化、酶切方法的优化,确立其分离纯化方法,并分析各企业未知蛋白的种类、数量、分子量、等电点分布及其工艺相关性。采用阴离子交换柱与凝胶过滤层析柱分别对白蛋白进行分离,结果显示,使用阴离子交换层析只能得到主成分单一峰,而使用凝胶过滤层析得三组峰,因此采用凝胶过滤层析对白蛋白中位置组分进行分离。采用胃蛋白酶和胰蛋白酶分别对各分离组分进行酶切,结果显示,胃蛋白酶酶切结果重复性较差且蛋白得分较低,而使用胰蛋白酶重现性良好,蛋白鉴定得分较高。对胰蛋白酶酶切效果进行进一步确证,结果发现,三次平行实验,共有11个蛋白被检出,其中共有8个蛋白每次均检出,说明方法稳定性较好。最终采用胰蛋白酶对人血白蛋白中的未知蛋白成分进行鉴定,结果显示五家生产企业产品,除一家企业杂蛋白较少外,另外四家企业所有批次样品均含有载脂蛋白A-Ⅱ(Apolipoprotein A-II)、人结合珠蛋白(Haptoglobin)、人血色素结合蛋白(Hempoexin)、α-1B-糖蛋白(Alpha-1B-glycoprotein)、α-2-HS-糖蛋白(Alpha-2HS-glycoprotein),且略有差异。对未知蛋白等电点进行分析发现,未知蛋白等电点与白蛋白较接近,可能在乙醇共沉淀时与白蛋白共同析出,初步可以说明未知蛋白为工艺相关蛋白;对未知蛋白分子量进行分析发现,未知蛋白以多聚体的形式存在于白蛋白中。
  以上结果表明,在临床应用中,应更加关注上述未知蛋白的过敏效应,在工业生产中,应优化生产工艺,尽可能去除无关蛋白,提高产品质量。本课题建立的白蛋白制剂杂蛋白质谱分析方法为探究临床不良反应提供了数据支持,为白蛋白制剂的一致性评价提供了新的方法,为血液制品的质量控制奠定了基础、提供了新思路。
摘要:目的:研究不同浓度小柴胡汤对B16黑素瘤细胞黑素合成相关酶酪氨酸酶(TYR),酪氨酸酶相关蛋白-1(TRP-1),酪氨酸酶相关蛋白-2(TRP-2)蛋白表达的影响.方法:采用CCK8检测细胞活力,选取小柴胡汤低、中、高浓度分别为0.1、1.0、2.5mg/mL用于实验,Western Blot法检测B16细胞中TYR、TRP-1、TRP-2蛋白的表达.结果:与对照组比较,随着浓度的增加,小柴胡汤水煎液能够显著下调细胞TYR、TRP-2蛋白的表达(P<0.05,P<0.01);小柴胡汤中、高浓度组较对照组降低TRP-1活性(P<0.01).结论:小柴胡汤对黑素合成的抑制作用除了通过直接抑制TYR活性外,还可通过下调酪氨酸酶家族其他成员TRP-1、TRP-2的基因表达、蛋白合成三方面实现其抑制黑素生成的作用,提示小柴胡汤对黑素生成的抑制可通过对酶蛋白转录后调节途径来实现.
[期刊论文] 刘颖 王文晞 姜红
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CSTPCD 北大核心
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摘要:目的 优化茯苓多糖的提取工艺,测定茯苓多糖分子量及其分布.方法 采用正交试验设计对影响茯苓多糖提取的因素(超声时间、料液比、提取温度、提取时间)进行优化;以葡萄糖为对照品通过苯酚硫酸法测定茯苓多糖的含量;高效尺寸排阻色谱-多角度激光光散射-示差折光联用(HPSEC-MALLS-RI)测定其分子量及其分布.结果 茯苓多糖的最佳提取工艺为超声时间30 min,液料比1∶50,提取温度100℃,提取时间4h;茯苓多糖含量为93.5%;测得茯苓多糖组分A的重均分子量为4.671×106(±1.003%)Da,分子量分布为12.3%,组分B的重均分子量为6.144×104(±2.466%)Da,分子量分布为87.7%.结论 本方法简便准确,可作为测定多糖分子量分布的方法.
[硕士论文] 刘颖
中西医结合临床 湖北中医药大学 2016(学位年度)
摘要:第一部分UV-X角膜交联机对兔眼角膜交联效果的实验研究
  目的:应用UV-X角膜交联机对兔眼角膜进行角膜交联及相关实验研究,验证该仪器的作用效果并作出评价,为下一步实验打下基础。
  方法:10只(20眼)日本大耳白兔,1只为正常对照组,9只随机取一眼为实验组,另一眼为对照组,双眼均刮去角膜上皮,实验组去上皮后用UV-X角膜交联机行交联术;术后1天、3天、7天各取3只兔子处死,取双眼角膜,并对取下的角膜组织作光镜(HE染色、VG染色)及电镜观察。
  结果:实验组每只眼睛都顺利完成角膜交联术。HE染色示交联后角膜均有水肿、炎性反应,但随着时间增长程度逐渐减轻,至术后第7天,角膜无明显水肿、炎性反应亦明显减轻。对照组炎症及水肿情况均较实验组轻,但其恢复较实验组慢。VG染色按照灰度差异将胶原纤维进行定量分析示,实验组胶原纤维的密度明显高于对照组,且经过交联的角膜靠近上皮层的纤维密度更高。电镜示实验组术后角膜细胞稍肿胀,细胞间连接较紧密,纤维排列较整齐,对照组细胞肿胀,内容物除个别内质网可见外其余溶解,细胞核增大,密度降低,胶原纤维间距增加。
  结论:应用UV-X角膜交联机进行角膜交联术稳定、安全、有效。经过该仪器交联过的角膜较未交联过的角膜更厚,纤维排列更整齐、密集。
  第二部分角膜交联术对酶消化抑制作用的实验研究
  目的:对比观察三种蛋白酶(胃蛋白酶、胰蛋白酶和胶原蛋白酶)对交联和未交联的兔眼角膜进行消化,验证角膜交联术对酶消化的抑制作用。
  方法:9只(18眼)日本大耳白兔,随机分为3组(每组3只),随机取一眼为实验组,另一眼为对照组,实验组行角膜交联术,对照眼仅刮去角膜上皮,之后立即将兔子处死并取双眼角膜,分别将取好的角膜放入配好的酶溶液中,并置于酶的最适温度,观察并记录消化过程角膜的形态变化及角膜被完全消化所用的时间。根据上一步实验情况再取18只(36眼)日本大耳白兔,每组6只(12眼),分别在消化的第1、3、7天随机各取出2只兔子剩余的角膜组织并作光镜观察(HE染色)。
  结果:角膜完全消化的时间为:胃蛋白酶实验组分别为66天、65天、59天,平均63.33±2.19天,对照组分别为61天、59天、52天,平均57.33±2.73天,实验组明显长于对照组(P<0.05);胰蛋白酶实验组分别为4天、4天、4天,平均4.00天;对照组分别为3天、3天、2天,平均为2.67±0.33天,实验组明显长于对照组(P<0.05);胶原蛋白酶实验组分别为7天、3天、5天,平均5±1.15天;对照组分别为2天、2天、2天,平均2.00天,实验组明显长于对照组(P<0.05)。角膜在酶溶液中随着时间变化皱缩、变薄最后溶解,实验组的变化均稍慢于对照组。HE染色示随着角膜在酶溶液中浸泡时间的增加,细胞逐渐肿胀、结构消失,角膜上皮逐渐变薄,但实验组变化均慢于对照组。
  结论:核黄素-角膜交联术能显著提高角膜对酶消化作用的抵抗力。
摘要:目的:研究不同浓度小柴胡汤对B16黑素瘤细胞黑素合成相关酶酪氨酸酶(tyrosinase,TYR),酪氨酸酶相关蛋白-1(tyrosinase related protein-1,TRP-1),酪氨酸酶相关蛋白-2(tyrosinase related protein-2,TRP-2)mRNA表达的影响.方法:采用CCK8检测细胞活力,选取小柴胡汤低、中、高质量浓度分别为0.1,1,2.5 g·L-1用于实验,逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测B16细胞中TYR,TRP-1,TRP-2 mRNA的表达.结果:与正常组比较,随着浓度的增加,小柴胡汤水煎液能够显著下调细胞TYR,TRP-1,TRP-2 mRNA的表达(P<0.05,P<0.01).结论:小柴胡汤对黑素合成的抑制作用除了通过直接抑制TYR活性外,还可通过下调酪氨酸酶家族其他成员TRP-1,TRP-2的基因表达、蛋白合成3方面实现其抑制黑素生成的作用,提示小柴胡汤对黑素生成的抑制可通过对酶蛋白转录后调节途径来实现.
摘要:目的:观察耳穴配合四物汤加味治疗老年皮肤瘙痒症的临床疗效.方法:将66例本病患者随机分为两组,治疗组36例采用耳穴贴压配合四物汤加味治疗,对照组30例采用单纯抗组胺药物治疗.结果:总有效率治疗组为97.2%,对照组为63.3%,两组比较,P<0.05 结论:耳穴配合四物汤加味治疗老年皮肤瘙痒症疗效满意.
[硕士论文] 刘颖
中西医结合临床 湖北中医药大学 2013(学位年度)
摘要:目的:通过观察口服中药调理湿热体质配合痤疮方治疗湿热体质痤疮患者的疗效,对中药调理体质在痤疮治疗的临床疗效和可行性上作出初步评价,进一步探讨调理体质在治疗痤疮方面的作用机理,为痤疮的预防措施和治疗方法提供更广阔的依据。
   方法:本课题依照中华中医药学会制定的标准,运用《中医体质分类与判定自测表》,对2012年3月至2013年1月于湖北中医药大学附属门诊皮肤科就诊的痤疮患者进行问卷调查,收集出66例确诊为痤疮并为湿热体质的患者,根据两种不同治疗方案随机分成2组,分别为治疗组,对照组。治疗组治疗方案为:口服中药调理体质配合服用痤疮方,每晚外用玫芦消痤膏一次。调体中药方组成:滑石24g,茵陈20g,黄芩10g,石菖蒲10g,浙贝母10g,木通10g,藿香12g,射干10g,连翘15g,薄荷8g(后下),白豆蔻12g;痤疮方组成:桑白皮15g,黄芩12g,夏枯草15g,生地30g,丹皮15g,栀子10g,银花15g,连翘15g,防风10g,茵陈15g,山楂15g,丹参20g。各煎水200ml,每日早上服用调体中药方,晚上服用痤疮方,连续服用1个疗程,2个月为1个疗程。
   对照组治疗方案为:痤疮方煎水200ml,日一剂早晚分服,每晚外用玫芦消痤膏一次,痤疮方的方药组成及服用疗程同治疗组。1个疗程后,观察两组患者治疗前后的病情变化情况、总体疗效情况、体质改善情况,1个疗程后2个月跟踪随访复发情况。
   结果:
   1.病情轻重比较:经治疗后,治疗组与对照组的皮损严重程度比较具有明显差异,P<0.05,有统计学意义,说明治疗组在改善皮损严重程度方面优于对比组。
   2.总体疗效情况:经治疗后,治疗组有效率达93.9%,对比组有效率达84.8%,经统计学分析,治疗组的疗效优于对照组(P<0.05)。
   3.体质变化情况:治疗组在治疗后统计的体质评分与治疗前统计的体质评分比较显著降低,具统计学意义,P值小于0.05,对照组的体质积分在治疗前后的变化无显著差异,无统计学意义,P值大于0.05,治疗后两组间的体质积分经统计学分析具有明显差异,P值小于0.05。说明治疗组有效改善了患者的体质情况,对照组的体质改善则不明显。
   4.复发情况:疗程结束后2月,治疗组复发率为14.8%,对照组复发率为21.4%,治疗组的复发率相比对照组较低,但是不具有统计学差异(P>0.05)。
   结论:两种治疗方案对于湿热质痤疮治疗均具有可靠的疗效,而中药调理湿热体质配合痤疮方治疗湿热质痤疮的疗效更满意,调理湿热体质可以从根本上改善患者的湿热体质类型,追根求源从病根着手,在预防和防止复发湿热质痤疮方面有着较大意义,值得临床上推广运用。
  
摘要:目的 探讨瘟必清口服液抗炎作用和免疫调节作用.方法 以小鼠为实验对象,灌胃给药,观察对二甲苯诱发小鼠耳廓肿胀、醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性的影响;通过小白鼠碳粒廊清试验,观察该制剂的免疫清除作用.结果 瘟必清口服液能抑制二甲苯诱发小鼠耳廓炎症,降低醋酸致炎后小鼠腹腔渗出液的伊文斯蓝含量;明显增强小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力.结论 瘟必清口服液有较好的抗炎作用,能增强小鼠的免疫功能.
摘要:瘢痕是一个非常古老的病种,古人很早就有了对瘢痕的认识,<太平圣惠方>中认为:疤痕是"疮愈,而毒气尚未全散"的结果.什么是"毒气尚未全散"?"毒气"又是怎么回事?一直不得而知.笔者结合"瘢痕自然化解法",对此进行了长时间的观察探索,有了一些新的见解:1 从瘢痕最初的形态看
摘要:目的:探索HPLC测定痛经膏贴中黄芩苷和汉黄芩素含量的方法.方法:Zorbax SB-C18(4.6 mm×250 mm 5μm)色谱柱;流动相:甲醇-水-磷酸(58:42:0.05);流速:1.0 mL·min-1;检测波长:278 nm.结果:黄芩苷的线性范围为(0.44~2.20)μg(γ=0.999 7),平均回收率为98.64%,RSD=1.17%;汉黄芩素的线性范围为(0.012 8~0.204 8)μg(γ=0.999 9),平均回收率为98.96%,RSD=2.08%;3批样品中黄芩苷和汉黄芩素的含量分别为7.33%、6.74%、7.29%和0.71%、0.65%、0.63%.结论:测定方法简便、准确,可同时测定痛经膏贴中黄芩苷和汉黄芩素含量.
摘要:目的:研究防茄软膏的制备工艺及其质量控制标准。方法采用了正交试验设计来寻找防茄软膏制备工艺的最佳方案,并进行的主要药效学及毒理学试验。结果对软膏中所用基质的种类、每种基质的用量,油相和水相的比例,调制的湿度及方法等方面,进行了多次试验比较,以研究得到最佳的软膏的调配方法及疗效。结论完成了制备工艺后,对防茄软膏的原料药和成药进行了薄层色谱定性和高效液相色谱定量的研究,采用了薄层色谱法鉴别制剂中的赤芍、桂枝、防己、白芷四味药材,结果表明薄层色谱斑点清晰,特征性强,重现性好,阴性无干扰。
摘要:目的:考察七种型号的大孔吸附树脂和聚酰胺对安宫宁黄酮成分吸附影响,优选安宫宁总黄酮成分纯化分离的大孔树脂.方法:以黄酮总含量为考察指标,采用静态吸附法,动态吸附法进行吸附和解吸附筛选 .结果:在静态吸附和动态吸附试验中均以SP825为最佳选用树脂.
摘要:股骨粗隆间骨折是老年人常见的多发病,尤其是女性多见.鉴于老年人体弱多病,各脏器机能衰退,且卧床时间较长,易发生多种饼发症,因此做好老年股骨粗隆间骨折的护理尤为重要.我们从2008年6月~2008年12月,对30例股骨粗隆间骨折病人通过护理配合临床治疗,取得满意效果,现报告如下.
摘要:人工膝关节置换术的目的是切除病灶、缓解疼痛、矫正畸形,重建一个稳定的关节,恢复改善膝关节的运动功能.适用于严重膝关节疼痛、不稳、畸形,日常生活严重障碍,经过保守治疗无效或效果不显著的病例,以及各种严重膝关节炎、骨性关节炎、少数老年人的髌股关节炎.2009年5月~2010年4月,我院骨科对40例膝关节施行了人工膝关节置换,经过精心的护理,均获得较满意效果,现报告如下.
摘要:中医药防治艾滋病学科是应用中医学理、法、方、药等理论结合现代科学技术,开展艾滋病诊断、治疗、预防和保健等研究与实践的学科.文章分为中医药防治艾滋病学科学科发展状况、发展成果、发展中存在的问题以及展望和对策四方面,具体从临床探索、科研课题、人才培养、基地建设方面介绍了中医药防治艾滋病学科的发展状况,同时从理论研究、基础研究、临床研究、药剂开发、队伍建设、学术交流方面分析了学科发展成果,并揭示了学科在中西药相互作用、基层医疗机构科研水平、人才流失、新药开发滞后方面存在问题,因此需要以防治传染病重大专项为契机,把中医药防治艾滋病项目打造成举国体制下的示范性中医药研究项目,创新中医药防治艾滋病项目的运行机制,综合集成技术优势,形成“纲举目张”的课题协作网络,为学科发展提供良好的平台,制定中医药项目责任专家组工作规程,加强管理和督导检查,对本学科的关键共性技术深入研究,解决瓶颈问题,颁布相关标准和规范,提高临床疗效,建立中医药防治艾滋病产学研用联盟,促进产学研用有机结合,进一步推广和运用已有成果,并加强人才培养,打造中医药防治重大传染病的一流临床科研团队。
[硕士论文] 刘颖
中药学 湖北中医药大学;湖北中医学院 2005(学位年度)
摘要:本课题首先进行了安宫宁贴剂中提取的有效部位的初步药效学筛选实验,通过离体小鼠子宫抑制实验确定了有效成分的部位,为提取工艺的设计和实验奠定研究方向;通过一系列的正交设计法优选了切实可行的优化提取工艺、精制纯化工艺以及制剂成型工艺;质量标准方面对黄芩原药材及安宫宁贴剂进行了薄层色谱定性鉴别的研究,对有代表性成分黄芩苷、汉黄芩素进行了含量测定研究,制定了控制该制剂质量的质控指标;针对主要成分,通过含量测定,进行了安宫宁贴剂的体外释放度实验以及离体透皮吸收实验;采用常温考察方法,对安宫宁贴剂进行了初步稳定性考察研究.
摘要:目的:探索牛黄复方制剂中牛黄成分的提取纯化及薄层鉴别.方法:将牛黄解毒片、牛黄上清丸等四种制剂以水超声提取、滤过,滤液以乙酸乙酯萃取供点样,比较三种显色方法.结果:所选提取纯化方法进行的牛黄成分的薄层色谱斑点清晰.结论:用所选方法提取纯化复方制剂中牛黄成分优于氯仿提取.
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