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摘要:菲莱氏温扬球虫是鸭球虫病的重要病原之一,为了寻找种特异性的遗传标记,本研究采集广东省某鸭场的新鲜鸭粪,通过Sheather's蔗糖漂浮法收集球虫卵囊,经形态学鉴定为菲莱氏温扬球虫;提取该球虫DNA样品,经过PCR扩增,首次获得了该虫的18S rDNA基因部分片段;对该基因进行了克隆和测序,比较了该虫株与其他原虫的亲缘关系.结果显示,对菲莱氏温扬球虫序列与艾美耳科其他球虫关系较近,系统进化树分析属于艾美耳科的另一分支.表明18S rDNA基因在鸭菲莱氏温扬球虫的分类鉴定上是一种有效的分子标记....
摘要:应用PCR技术对在鸭粪中发现的疑似环孢子虫的18 S rDNA部分基因和ITS-1+基因进行了扩增,将扩增出的片段纯化后连接至pMD-18T载体上,选取阳性克隆进行序列测定,并利用NCBI在线BLAST程序和MEGA 4软件对测序结果进行了同源性比较和系统发育树构建.结果显示,测得的18 S rDNA序列与环孢子虫的相似性最高(98%),且在系统树中位于同一分支上;测得的ITS-1序列高度特异,在GenBank中未发现同源性序列,可以确定其为环孢子虫的一个新种,暂命名为鸭源环孢子虫....
摘要:目的 对犬粪中的疑似环孢子虫卵囊进行形态学和分子鉴定.方法 对首次在犬粪中发现的疑似环孢子虫卵囊的形状、大小、抗酸染色、孢子化和自发荧光等形态特征进行了观察.根据GenBank已发表的环孢子虫序列设计并合成3条引物,对犬源环孢子虫18SrDNA部分序列进行巢氏PCR扩增,将扩增产物纯化并克隆至载体pMD19-T,挑选阳性克隆测序并进行同源性及系统进化分析.结果 该疑似环孢子虫卵囊与人的环孢子虫卵囊形态特征相似,扩增的18SrDNA片段大小为715bp,与预期目的片段一致.序列同源性和系统发育分析显示该犬源环孢子虫与环孢子虫间的相似性最高,系统进化树中处于同一分支.结论 首次从犬粪中发现的疑似环孢子虫卵囊可以确定为环孢子虫....
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北大核心 CSTPCD CSCD AJ CA CBST
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摘要:目的 研制禽类贝氏隐孢子虫的PCR检测试剂盒.方法 根据贝氏隐孢子虫18S rRNA和ITS-1序列,选取遗传标记位点最多的一段核苷酸序列作为特异PCR引物的靶序列,设计、合成了一对针对贝氏隐孢子虫的特异性引物 (YJWF:5'-ACTGATATACAATACCACGG-3'和YR:5'-GCGGATAAAGTTCAGGTTC-3'),对PCR反应条件进行了一系列优化,并分别对试剂盒的特异性、敏感性、稳定性、重复性和保存期等进行了系列研究.结果 该试剂盒能特异性地扩增出贝氏隐孢子虫基因组中相应片段,与安氏隐孢子虫,微小隐孢子虫,柔嫩艾美尔球虫等相关原虫基因组DNA无交叉反应;最低能检测到3.48个卵囊;反复冻融50次对试剂盒没有影响;室温条件下至少可保存4个月.结论 该试剂盒的各项指标达到了贝氏隐孢子虫的检测要求....
[期刊论文] 杨建伟 刘霞 李国清
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北大核心 CA
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摘要:鸡隐孢子虫病与球虫病是鸡群中重要的常见的两种原虫病,对鸡的危害十分严重,且分布广泛,世界各地普遍有这两种病的发生与报道....
摘要:选择柔嫩艾美耳球虫、巨型艾美耳球虫和堆型艾美耳球虫人工混合感染岭南黄鸡,采用笼养和平养的方法,比较球安(Avatec)与甲基盐霉素、盐霉素、马杜霉素和球虫康对鸡球虫感染的保护效能.笼养试验结果显示,球安按110 mg/kg添加到饲料中,对3种球虫超高剂量(15万个孢子化卵囊)的混合感染具有很强的抑杀作用,其抗球虫指数和饲料报酬分别为181.5和1.77.平养试验显示,在球虫持续感染的情况下,从增重方面看,与阳性对照相比,球安组、甲基盐霉素和球虫康组在20、30、40和50日龄段体重始终差异极显著.除了盐霉素和马杜霉素以外,各试验组屠宰率与阳性对照相比差异不显著;与阴性对照相比差异不显著.在胸肌率方面,无论是与阴性对照还是与阳性对照相比,均为差异不显著....
摘要:为了建立犬源环孢子虫的PCR检测方法,根据该环孢子虫18 S rDNA基因序列,设计1对特异性引物;通过阳性参照摸索出该检测方法的最佳反应条件,进行了特异性和敏感性试验;并对临床样品进行了检测.结果显示,该PCR检测方法能特异性地扩增出犬源环孢子虫18 S rDNA中379 bp的片段,与牛源环孢子虫、柔嫩艾美耳球虫、人隐孢子虫、蓝氏贾第虫、刚第弓形虫、毛首线虫、大片吸虫、犬弓首蛔虫等8种虫体基因组DNA无交叉反应;最低能检测到84 fg的阳性参照DNA,检测的157份临床样品中8份为阳性,比传统镜检方法多出3份.结果表明,建立的PCR检测方法具有较高的特异性和敏感性,可用于犬环孢子虫的临床检测....
摘要:采用饱和蔗糖漂浮法、改良抗酸染色法和孢子化试验首次从广东某猴场的猴粪中分离到疑似环孢子虫卵囊.为了对其进行分子鉴定,采用巢式PCR和普通PCR方法,针对环孢子虫属18 S rDNA和ITS基因设计了3对引物,扩增其目的片段,并进行了序列分析.结果显示,卵囊大小为7.5~10 μm,经改良抗酸染色的卵囊染色程度不一,孢子化卵囊内含2个孢子囊,每个孢子囊内含有2个子孢子.通过PCR扩增,获得的18 S rDNA目的片段长712 bp,测序结果表明该猴源环孢子虫18 S rDNA基因与Cyclospora colobi、狒狒环孢子虫、人环孢子虫的相似率较高,在进化树上位于同一分支.获得的ITS-1+片段长760 bp,其中ITS-1序列高度特异,在GenBank中未见同源性序列.结果表明,从猴粪中分离的疑似环孢子虫卵囊应属于环孢子虫....
摘要:禽隐孢子虫病主要是由贝氏隐孢子虫(Cryptosporidium baileyi)寄生于禽类呼吸道、泄殖腔及法氏囊黏膜上皮细胞内所引起的一类严重的机会致病性原虫病....
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