绑定机构
扫描成功 请在APP上操作
打开万方数据APP,点击右上角"扫一扫",扫描二维码即可将您登录的个人账号与机构账号绑定,绑定后您可在APP上享有机构权限,如需更换机构账号,可到个人中心解绑。
欢迎的朋友
万方知识发现服务平台
找到 1 位学者
中国农业科学院生物技术研究所
获取范围
  • 1 / 1
  (已选择0条) 清除 结果分析
找到 18 条结果
摘要:渗透胁迫诱导蛋白OsmC与有机氢过氧化物抗性蛋白Ohr都属于OsmC超家族抗氧化物酶,在细菌抵御有机或无机过氧化反应的过程中起重要作用。耐辐射异常球菌(D. radiodurans R1)中osmC基因(DR_1538)与ohr基因(DR_1857)分别编码了OsmC超家族中的这两种抗氧化物酶。运用体外三段融合PCR方法和线性转化方法,首次构建了壮观霉素抗性完全缺失突变株ΔosmC和卡那霉素抗性完全缺失突变株Δohr。对ΔosmC、Δohr突变株和野生型菌株分别都进行CHP(异丙苯基过氧化氢)、H2O2 和NaCl胁迫处理,结果显示,与野生型相比,ΔosmC突变株对H2O2异常敏感,而Δohr突变株对CHP更敏感,两个突变株对NaCl胁迫都没有大的变化。QRT-PCR结果显示在H2O2和NaCl胁迫下野生型菌株中osmC基因都上调,其中H2O2胁迫下基因上调水平显著;在CHP和NaCl胁迫下野生型菌株中ohr基因基因上调大约2倍左右。根据结果推测同属于OsmC超家族的两个过氧化物酶选择底物的偏好性与作用方式可能并不一样,OsmC蛋白可能主要是以无机过氧化物作为底物,而Ohr蛋白可能主要是以有机过氧化物为底物。 The osmotic stress induced protein (OsmC) and organic hydroperoxide resistance protein (Ohr) were two antioxidant enzymes which play an important role in bacteria defensing organic or inorganic peroxidation. The osmC gene (DR_1538) and ohr gene (DR_1857) of Deinococcus radiodurans (D. radiodurans R1) encoded the two antioxidant enzymes in the OsmC superfamily. Fusion PCR of three sections in vitro and linear transformation method were used to firstly construct the spectinomycin-resistant mutant stain (ΔosmC) and the kanamycin-resistant mutant strain (Δohr). The ΔosmC, Δohr mutants strain and wild-type strain were treated with CHP (cumene hydroperoxide), H2O2 and NaCl stress treatments. The result showed that ΔosmC mutant is extremely sensitive to H2O2 compared with the wild type, while Δohr mutant is more sensitive to CHP and the two mutant strains had no changes after NaCl stress. QRT-PCR results displayed that the osmC gene of the wild-type strain were up-regulated in both H2O2 and NaCl stress treatments, and the osmC gene in H2O2 stress levels was significantly upregulated. The ohr genes in wild-type strain after CHP and NaCl stress treatments upregulated approximately 2-folds. From above, it was presumed that there may be different at the preference of two peroxidases in OsmC superfamily selecting substrates and the mode of those interacting with their substrate; OsmC proteins may mainly use inorganic peroxide as its substrate and Ohr protein may be primarily based on the organic peroxide as its substrate....
摘要:旨为深入发掘角蛋白酶重要的基因资源,进一步提高其水解酶活,为工业生产提供理论基础.从分离于新疆戈壁沙漠的戈壁异常球菌(Deinococcus gobiensis)Ⅰ-0中克隆出一个编码角蛋白酶的基因并命名Dgker.构建原核表达载体pET-22b-Dgker并进行体外诱导表达纯化,通过对羽毛水解活性的测定探究粗酶液的最适温度和pH.结果 显示,Dgker蛋白N端前50个氨基酸对蛋白的表达纯化有很大影响.Dgker的重组菌株3d完全分解羽毛,在奶粉平板上重组菌株粗酶液比空载菌株粗酶液降解圈更显著.Dgker适应的温度和pH较为广泛其中最适温度是60℃、最适pH是5.0.Dgker能降解羽毛在以后的工业生产及处理废弃羽毛有极大的应用空间....
摘要:LEA5C(Group 5C Late Embryogenesis Abundant)家族蛋白参与非生物胁迫反应并以分子伴侣的形式保护细胞内生物大分子不受损伤.分离于新疆戈壁沙漠的戈壁异常球菌(Deinococcus gobiensis)I-0具有极端的电离辐射、氧化、干燥等抗性.功能基因组注释表明Dgo_CA1605编码蛋白属于LEA5C家族,命名为Dgl5,对Dgl5生理功能展开研究.采用同源重组的方法构建Dgl5重组表达菌株.非生物胁迫实验结果表明,Dgl5能够显著增强表达菌株BL21盐胁迫抗性,最大限度地保护宿主菌免受反复冻融的损伤;体外生理生化实验结果表明在反复冻融条件下,Dgl5能够有效保护苹果酸脱氢酶(MDH)和乳酸脱氢酶(LDH)酶学活性.因此推测,在冷冻、高盐胁迫条件下,Dgl5蛋白通过保护细胞体内相关酶类的活性,增强宿主菌抵抗外界复杂多变的极端环境....
摘要:[目的]鉴定和确定被预测为编码干燥相关蛋白的耐辐射异常球菌(Deinococcus radiodurans) drB0118基因功能,探讨该基因对盐、渗透和氧化胁迫抗性的作用.[方法]构建drB0118基因缺失突变株(△B0118),通过氯化钠、D-山梨糖醇和过氧化氢等胁迫冲击实验及氧化胁迫条件下qRT-PCR分析,研究drB0118突变对非生物胁迫反应及氧化胁迫相关基因表达的影响.[结果]drB0118突变导致菌株对NaC1和D-sorbitol胁迫的抗性降低;对氧化胁迫(H2O2)敏感;qRT-PCR分析显示,drB0118突变引起氧化胁迫抗性基因pod和oxyR分别下调4倍和10倍.[结论]D.radiodurans中drB0118参与了盐、渗透和氧化等多种非生物胁迫反应....
摘要:为研究耐辐射异常球菌(Deinococcus radiodurans)中drfE编码的铁蛋白DrfE的功能,通过基因回补试验构建drfE基因的回补菌株(pdrfE::△),对野生型WT、突变株ΔdrfE及回补菌株pdrfE::△进行不同浓度H2O2和NaCl胁迫,分别测定野生型WT、突变株ΔdrfE和回补菌株pdrfE::△体内Fe2+含量及抗氧化酶类活性.结果显示,drfE基因缺失导致菌株对氧化和盐胁迫敏感,该基因的回补能够恢复菌株对氧化和盐胁迫的抗性.drfE基因缺失导致耐辐射异常球菌体内Fe2+浓度由232 μmol/L增加至293 μmol/L;80 mmol/L H2O2处理30 min后,突变株ΔdrfE的CAT活性下降32.74%,SOD下降41.3%.以上结果表明DrfE蛋白可能参与耐辐射异常球菌铁代谢途径,并且在细胞抗氧化体系中发挥重要作用....
摘要:耐辐射异常球菌(D.radiodurans R1)ktrA基因(DR_1666)编码的K+吸收蛋白在盐胁迫和渗透胁迫中起着重要作用.采用QRT-PCR分析表明在盐和D-山梨糖醇胁迫条件下,野生型菌株中ktrA基因表达均显著上调.同时采用融合PCR方法和同源重组技术,构建ktrA基因缺失突变株(△ktrA),以野生型菌株DR做对照,分别用不同浓度的氯化钾和D-山梨糖醇对突变株进行胁迫处理.结果显示,突变株△ktrA对氯化钾和D-山梨糖醇的敏感性明显高于野生型,表明ktrA基因在菌株耐受高盐和高渗透胁迫时起重要作用.该结果为深入研究D.radiodurans R1菌株中ktrA基因的功能提供了很好的基础....
摘要:LEA3(group 3 late embryogenesis abundant proteins)是一类非生物胁迫响应蛋白,能够保护细胞免受胁迫损伤.戈壁异常球菌(Deinococcus gobiensis)I-0分离于干旱、温差大及强阳光辐射的戈壁沙漠环境,具有超强的耐受紫外(UV)辐射、电离辐射和干燥等胁迫的能力,其基因组中Dgo_CA1631基因编码蛋白与LEA3具有一定同源性,将该蛋白命名为Dgl3,并对其生物学功能展开研究.非生物胁迫实验表明,Dgl3蛋白能够显著增强表达菌株BL21对氧化和冷冻胁迫的抗性,最大限度地保护宿主菌免受损伤.体外酶活保护实验结果进一步表明,氧化和反复冻融胁迫条件下Dgl3蛋白能够保护苹果酸脱氢酶(MDH)和乳酸脱氢酶(LDH)的活性.因此推测,Dgl3蛋白通过保护细胞体内相关酶类的活性,增强宿主细胞对氧化和冷冻胁迫的抵抗能力....
摘要:耐辐射异常球菌(Deinococcus radiodurans,DR)因其具有对非生物胁迫超强的抵抗能力而备受关注.旨在了解该菌亲水蛋白Dlp在细胞耐受非生物胁迫中的作用,采用融合PCR和基因同源重组技术,获得了dlp基因缺失突变株Δdlp,对野生型DR及突变株Δdlp进行非生物胁迫.结果表明,dlp的缺失导致DR细胞对高盐和氧化胁迫敏感.体外检测氧化胁迫条件下Dlp蛋白对苹果酸脱氢酶(MDH)和乳酸脱氢酶(LDH)活性的保护,结果显示,Dlp蛋白的加入能缓解氧化胁迫条件下MDH、LDH酶活性的损失.由此表明,亲水蛋白Dlp增强了耐辐射异常球菌对非生物胁迫的抗性,并能以类似分子伴侣的形式保护胁迫条件下酶的活性....
摘要:耐辐射异常球菌(D.radiodurans R1)osmC基因(DR_1538)编码的渗透诱导胁迫蛋白是一种在氧化胁迫中起重要作用的过氧化物酶.用PCR方法从耐辐射异常球菌中扩增出osmC基因的全长序列(441bp),采用原核表达系统对其进行表达纯化,获得了分子量大小约为18.7 kDa的带有His标签的融合蛋白.利用在线网站对OsmC蛋白的生物信息学分析,结果表明:OsmC蛋白由146个氨基酸组成,理论等电点为5.81,为亲水性蛋白;二级结构主要是由α-螺旋及不规则卷曲组成.OsmC蛋白的纯化及生物信息学分析为后续深入研究其功能奠定了基础....
摘要:耐辐射异常球菌(D.radiodurans R1)osmC基因(DR_1538)编码的渗透诱导胁迫蛋白是一种在氧化胁迫中起重要作用的过氧化物酶.用PCR方法从耐辐射异常球菌中扩增出osmC基因的全长序列(441bp),采用原核表达系统对其进行表达纯化,获得了分子量大小约为18.7 kDa的带有His标签的融合蛋白.利用在线网站对OsmC蛋白的生物信息学分析,结果表明:OsmC蛋白由146个氨基酸组成,理论等电点为5.81,为亲水性蛋白;二级结构主要是由α-螺旋及不规则卷曲组成.OsmC蛋白的纯化及生物信息学分析为后续深入研究其功能奠定了基础....
[专利] 发明专利 CN201610474340.7
摘要:本发明提供一种了具有保护酶活性功能的重组蛋白。实验结果表明,本发明提供的重组蛋白能够在逆境条件下保护酶的活性,并且可减少酶发生聚集,防止其结构发生改变。
[专利] 发明专利 CN201610474347.9
摘要:本发明在Dhp(DR1172)蛋白中发现了亲水结构域对酶的保护作用。本发明表达了含有完整亲水结构域的核心蛋白。实验结果表明,所述蛋白在液氮反复冻融和H2O2冲击的逆境条件下均能够保护苹果酸脱氢酶(MDH)和乳酸脱氢酶(LDH)的活性,并且均可减少LDH聚集,防止其结构发生改变从而保护其活性。
  (已选择0条) 清除
公   告

北京万方数据股份有限公司在天猫、京东开具唯一官方授权的直营店铺:

1、天猫--万方数据教育专营店

2、京东--万方数据官方旗舰店

敬请广大用户关注、支持!查看详情

手机版

万方数据知识服务平台 扫码关注微信公众号

万方选题

学术圈
实名学术社交
订阅
收藏
快速查看收藏过的文献
客服
服务
回到
顶部