绑定机构
扫描成功 请在APP上操作
打开万方数据APP,点击右上角"扫一扫",扫描二维码即可将您登录的个人账号与机构账号绑定,绑定后您可在APP上享有机构权限,如需更换机构账号,可到个人中心解绑。
欢迎的朋友
万方知识发现服务平台
获取范围
  • 1 / 1
  (已选择0条) 清除 结果分析
找到 3 条结果
摘要:哺乳动物胚胎体外培养体系影响着早期胚胎的发育潜能,在目前模拟体内输卵管及子宫的低氧环境的培养系统中,活性氧(reactive oxygen species,ROS)被认为是影响胚胎发育的一个重要因素.本实验探究了ROS在小鼠(Mus musculus)体外发育2细胞阻滞胚胎中对线粒体相关机能的影响.本研究使用2,2-偶氮二(2-甲基丙基咪)二盐酸盐(2,2'-Azobis (2-methylpropionamidine) dihydrochloride,AAPH)处理昆明白小鼠体外受精卵,通过荧光探针检测处理前后与线粒体活性相关的线粒体膜电位、线粒体ROS(mtROS)及线粒体分布状态的变化,并利用qRT-PCR检测ROS相关基因、线粒体转录因子A(mitochondrialtranscription factorA,TFAM) mRNA的表达量及mtDNA的拷贝数.研究结果显示,使用1.0 mmol/L浓度的AAPH分别处理的胚胎,具有较高的阻滞率(66.16%)和较低的损伤率(24 h畸形率9.09%,48 h死亡率10.39%),ROS染色实验结果显示,AAPH处理能够使胚胎内胞质ROS水平明显升高,所检测的ROS相关基因mRNA表达量升高.1.0 mmol/L处理后二细胞期胚胎线粒体膜电位及mtROS水平明显高于对照组,mtDNA的拷贝数增加,qRT-PCR结果显示,处理组TFAM基因的表达量明显高于对照组.以上研究表明,AAPH处理引起的氧化应激反应及发育阻滞的胚胎中,线粒体活性升高,线粒体数目增加,线粒体转录因子A表达增强,表明线粒体参与调节细胞内ROS的动态平衡.本研究初步探究了ROS与线粒体相关功能变化的关系,为揭示卵母细胞成熟机制和优化哺乳动物胚胎体外培养体系提供了参考....
[硕士论文] 刘瑞花
动物学 内蒙古大学 2018(学位年度)
摘要:miRNAs是长度为22nt的内源性非编码RNA,在体内作为信号分子参与调节多种细胞活动.miRNAs的异常表达常与疾病发生相关,并且在癌症的诊断、治疗和预后方面具有临床应用潜力.本文对miR-342-5p在非小细胞肺癌(non-small-cell carcinoma,NSCLC)细胞A549和H460中的作用及其调节机制进行了研究.
  1.miR-342-5p在NSCLC A549和H460中的表达及作用
  为探究miR-342-5p在A549和H460中的作用,本研究首先利用实时定量PCR(qPCR)检测miR-342-5p在肺癌细胞A549和H460中的表达,结果显示miR-342-5p在A549和H460中的表达低于正常的肺上皮细胞HBE.其后,将miR-342-5p mimics分别转染A549和H460细胞,通过提高miR-342-5p在细胞中的表达检测其对肺癌细胞恶性表型的影响.结果显示,miR-342-5p的表达升高后显著抑制了A549和H460的增殖、迁移、侵袭和克隆形成能力.为进一步验证这一结果,将构建的过表达miR-342-5p的慢病毒载体感染A549和H460细胞,并利用嘌呤霉素筛选出稳定过表达细胞.细胞恶性表型检测结果表明,稳定过表达miR-342-5p同样显著抑制了A549和H460细胞的增殖、迁移和克隆形成能力.最后,将稳定过表达miR-342-5p的H460细胞皮下注射到裸鼠体内,结果显示,与对照组相比miR-342-5p抑制了H460的体内成瘤率,肿瘤的体积和重量也减少.上述结果表明miR-342-5p在肺癌细胞中具有抑癌基因的作用.
  2.miR-342-5p靶基因检测及其相互作用关系并验证
  为了探讨miR-342-5p影响A549和H460细胞恶性表型的作用机制,首先利用TargetScan7等软件预测了miR-342-5p的靶基因,并用qPCR检测了各候选靶基因在A549和H460中的表达,在检测的候选靶基因中,ELP3、FURIN和PPARGC1A等基因在两种肺癌细胞中的表达都显著高于HBE细胞,而在过表达miR-342-5p的两种肺癌细胞中这3个基因的表达量都显著降低.之后用荧光素酶报告实验(Luciferase assay)证明PPARGC1A是miR-342-5p的一个靶基因.
  为进一步验证miR-342-5p和靶基因PPARGC1A之间的相互作用,本研究合成了PPARGC1A基因的干扰片段,转染细胞后降低了PPARGC1A基因的表达量.细胞恶性表型检测表明,A549和H460细胞的增殖、迁移、侵袭和克隆形成能力都受到了显著的抑制.
  综上所述,miR-342-5p在肺癌细胞A549和H460中低表达,miR-342-5p过表达后,可降低A549和H460细胞的增殖、迁移、侵袭及克隆形成的能力,并抑制体内成瘤.荧光素酶报告实验证明PPARGC1A是miR-342-5p的一个靶基因,降低PPARGC1A的表达量能显著抑制细胞恶性表型.因此,miR-342-5p抑癌的作用可能是通过直接靶向PPARGC1A基因起作用.
摘要:该研究探讨了人脐带间充质干细胞(human umbilical cord-derived mesenchymal stem cells,hUC-MSCs)提取物对人肺腺癌细胞A549增殖和迁移能力的影响及其作用机制.利用超声破碎法制备hUC-MSCs提取物,并处理经链球菌溶血素O(streptolysin O,SLO)通透的A549细胞.采用MTT法、平板克隆形成实验检测hUC-MSCs提取物对A549细胞增殖的影响,Transwell实验检测细胞迁移能力,实时荧光定量PCR检测促凋亡基因胱冬肽酶-3(caspase-3)、胱冬肽酶-9(caspase-9),抑癌基因RUNX3(runt-related transcription factor 3)和存活蛋白基因(survivin)的rnRNA水平,亚硫酸氢盐测序检测R UNX3启动子区CpG岛甲基化水平.结果发现,经hUC-MSCs提取物处理后,A549细胞的增殖、迁移能力均显著降低,caspase-3、caspase-9和RUNX3 mRNA水平显著升高,survivin mRNA的表达量显著降低,UNX3启动子区CpG岛显著去甲基化.该研究结果表明,hUC-MSCs提取物可能通过逆转RUNX3启动子区甲基化状态恢复其表达,并通过提高caspase-3、caspase-9表达及降低survivin的表达来抑制A549的增殖及迁移能力....
  (已选择0条) 清除
公   告

北京万方数据股份有限公司在天猫、京东开具唯一官方授权的直营店铺:

1、天猫--万方数据教育专营店

2、京东--万方数据官方旗舰店

敬请广大用户关注、支持!查看详情

手机版

万方数据知识服务平台 扫码关注微信公众号

万方选题

学术圈
实名学术社交
订阅
收藏
快速查看收藏过的文献
客服
服务
回到
顶部