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[硕士论文] 刘珍珍
发育生物学 东北林业大学 2018(学位年度)
摘要:Nupr1是一个肿瘤应激相关小分子核蛋白,具有复杂的调节模式,其在应激反应、癌症以及多种细胞生理活动中起重要作用。Nupr1能被TGFβ通过SMAD信号途径转录激活,参与TGFβ信号通路调节细胞的生理活动。Nupr1可与多种分子作用参与细胞内质网应激途径调节的自噬,与细胞的增殖、凋亡相关。
  本研究通过建立小鼠早期妊娠模型、假孕妊娠模型、延迟着床及激活模型、人工蜕膜化模型和激素处理模型,采用原位杂交的方法检测Nupr1mRNA在小鼠各种模型子宫组织中的定位表达情况,并应用实时荧光定量PCR法检测早期妊娠模型和假孕妊娠模型中Nupr1mRNA的相对表达量。结果显示,Nupr1mRNA在小鼠早期妊娠第1~4天子宫的腔上皮和腺上皮表达,第5天除表达于腔上皮,腺上皮并在基质细胞中表达,第6~8天表达于蜕膜区域;延迟模型中信号表达于小鼠子宫的腔上皮和腺上皮,与早期正常妊娠第4天结果相似;激活模型中信号表达于初级蜕膜区,与早期妊娠第5天表达结果相似;人工蜕膜化模型中信号表达于蜕膜区而蜕膜对照组中信号表达于腔上皮和腺上皮;相比于油处理的对照组,17β-雌二醇处理组信号表达于腔上皮和腺上皮,信号增强;孕酮处理组信号表达于腔上皮和腺上皮;孕酮和17β-雌二醇共同处理组表达无明显变化;Real-Time PCR检测结果显示Nupr1mRNA在早期妊娠第1、2天的表达量逐渐增强(P<0.05),早期妊娠1~8天中第2天相对表达量最高,第2~4天先降低再上升,第4~6天表达逐渐降低,第6~8天表达量变化不大(P<0.05);Nupr1mRNA在假孕第2天表达相对较高,第3~4天无明显变化,第5天相比第4天有升高趋势。
  实验结果表明,Nupr1mRNA在小鼠子宫中表达呈现时空特异性的变化,Nupr1与小鼠早期妊娠的着床进程相关;Nupr1mRNA在小鼠子宫腔上皮和腺上皮的表达可能受到激素的调节,在小鼠子宫基质细胞中的表达可能与胚泡的活化及蜕膜化相关。
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