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摘要:用透射电子显微镜观察了繁殖季节异源四倍体鲫鲤成熟精巢、卵巢血液中红细胞超微结构.成熟精巢由许多小叶组成,小叶内可观察到精原细胞、精子细胞大量成熟二倍体精子.精原细胞的细胞质内可见核糖体、内质网、线粒体电子致密物质;支持细胞的细胞质中可见内质网明显的可能与激素合作有关的颗粒状物质.二倍体精子由头部尾部组成,头部内充满致密染色质,尾部中央轴丝具有典型"9+2"微管结构.成熟卵巢中ⅣⅤ时相卵母细胞外包围着两层滤胞细胞;内层滤胞细胞伸出微绒毛深入透明带卵黄膜内,并一直延伸到卵细胞的细胞质内.推断微绒毛具有物质信息交流的功能.Ⅳ时相Ⅴ时相卵母细胞内的卵黄具有两种形式,一种其外有囊泡包围,另一种外面没有.红细胞中32.43%的细胞核具有独特的哑铃状结构,超微结构显示这种哑铃状结构为细胞核的弯曲变形现象;少数红细胞核有一分为二的分裂现象.红细胞核的这些特征可作为区别四倍体鱼二倍体鱼的重要标志.在亚显微水平证明四倍体鲫鲤具有正常的成熟精巢卵巢,它们能够产生正常的二倍体精子卵子,保证四倍体性能代代相传....
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CSTPCD 北大核心 SCI
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摘要:用精巢细胞直接制片法观察了异源四倍体鲫鲤、三倍体湘云鲫二倍体红鲫、湘江野鲤精母细胞染色体第一次减数分裂中期配对情况;作为对照,观察了上述四种鱼肾细胞的有丝分裂中期染色体.在精母细胞第一次减数分裂中,异源四倍体鲫鲤同源染色体两两配对,形成100个二价体,没有观察到单价体、三价体四价体;三倍体湘云鲫精母细胞形成50个二价体50个单价体;红鲫湘江野鲤精母细胞分别形成50个二价体.肾细胞检测表明异源四倍体的染色体数目为4n=200;湘云鲫为3n=150;红鲫湘江野鲤分别为2n=100.减数分裂时染色体分布情况与肾细胞染色体检测结果相吻合.具有四套染色体的异源四倍体鲫鲤在减数分裂中只形成100个二价体,而不形成25个四价体或其它形式,为产生稳定一致的二倍体配子提供了重要的遗传保障,也为人工培育的异源四倍体鲫鲤群体能够世世代代自身繁衍下去提供了重要的遗传学证据.三倍体湘云鲫在减数分裂过程中出现二价体、单价体共存,同源染色体在配对分离中出现紊乱,导致非整倍体生殖细胞的产生,为湘云鲫的不育性提供了染色体水平上的证据[动物学报 51(1):89-94,2005]....
摘要:用特异于HMG-box保守区的兼并引物扩增了异源四倍体鲫鲤及其原始亲本(红鲫鲤鱼)的Sox基因. 异源四倍体鲫鲤的扩增产物共有4条带,大小分别约为200,600,900 1900?bp,而其原始亲本的扩增产物只有3条带,且在雌雄个体中未发现性别特异扩增带. 回收雄性四倍体鱼600?bp扩增带,经亚克隆及测序分析得到一个新的编码71个氨基酸残基的基因. 该基因与虹鳟鱼(Oncorhynchus mykiss)、蟾蜍(Xenopus laevis)、鲤鱼(Cyprinus carpio)等的Sox9基因相似性达97%,据此命名为Atsox9a. 通过计算机分析RT-PCR方法确定该基因含有内含子,并获得其内含子的序列剪切位点,此内含子剪切位点在进化上是保守的. Atsox9a对于研究异源四倍体鲫鲤性别决定分化机制及脊椎动物性别进化具有重要的理论意义....
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北大核心 CSTPCD CSCD AJ CA CBST SA
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摘要:以异源四倍体鲫鲤为父本,二倍体金鱼为母本通过倍间杂交形成三倍体鲫鱼.对三倍体鲫鱼早期胚胎发育过程进行了观察.三倍体鲫鱼成熟卵子呈黄色,圆形,有粘性,卵径为1.3~1.4 mm.水温为(20±1)℃情况下,卵子受精后1 h,卵裂开始.受精后在~3 h时间段内进行卵裂.受精后3.50 h逐渐进入早、中、晚囊胚期,受精后10 h进入原肠期,受精后15.50 h进入神经胚期,19.0 h后器官开始形成.受精后63~75 h,仔鱼孵化出膜.另外,对三倍体鲫鱼受精卵进行切片观察,结果表明:三倍体囊胚期细胞分裂旺盛,原肠期细胞表现出正常的细胞分裂、细胞变形迁移行为.结合三倍体鲫鱼胚胎外观发育观察,说明三倍体鱼具有正常的早期胚胎发育过程,为三倍体鱼的大规模生产提供了胚胎发育生物学依据....
摘要:本文采用性腺染色体制片及组织学切片方法,系统地研究了不同发育时期的鲫鲤杂交第二代(F2) (2n=100)、异源四倍体鲫鲤(4n=200)、三倍体鲫鱼(3n=150))、雌核发育二倍体鲫鲤第二代(G2)(2n=100)及鲤鱼(Cypninus carpio L)(2n=100)(对照组)生殖细胞的染色体特征.研究结果表明,对照组中鲤鱼精原细胞染色体数与体细胞染色体数一致,为二倍体精原细胞(2n=100),而远缘杂交形成的二倍体鱼多倍体鱼的生殖细胞中则观察到明显的染色体数加倍现象,其中,鲫鲤杂交第二代(F2)精巢生殖细胞染色体数加倍现象特别丰富,占检测的染色体分裂相的21.6%,为其产生不减半的二倍体配子提供了直接的细胞学证据,同时也说明远缘杂交是导致生殖细胞染色体数加倍的一个重要因素.该研究在探讨多倍体鱼的发生及鱼类遗传育种方面具有重要意义....
摘要:在细胞信号网络中丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号传递途径起着极为重要的作用,控制着细胞多种生理过程,如细胞生长、发育、分裂、死亡等.ERK是MAPK家族重要的成员,通过检测三倍体湘云鲫胚胎成体组织中ERK1/2的表达情况,初步研究ERK在鱼类发育中的作用.蛋白免疫杂交结果显示ERK1/2在三倍体湘云鲫的胚胎发育各个时期组织中均有较高的表达,该结果表明ERK在鱼类发育的过程中发挥重要的作用....
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北大核心 CSTPCD CSCD AJ CA CBST SA
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摘要:雌核发育二倍体鲫鲤第二代(G2)产生的卵子经紫外线灭活的散鳞镜鲤精子的诱导,无需染色体加倍处理,可以发育成为雌核发育鲫鲤第三代(G3).描述了G3的早期胚胎发育过程.雌核发育鲫鲤的卵为粘性卵,色素含量高,在(19±1)℃水温下,受精后70 min第一次卵裂,原肠晚期统计受精率为37.36%,约89 h后,受精卵开始脱膜,约106.5 h后,胚体完全脱膜,最终统计孵化率为26.11%....
摘要:JNKs是丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)家族重要成员,参与应激反应动物体轴的构建.为了进一步了解JNK家族在动物发育中的功能,首次分离克隆了金鱼jnk3基因,研究了jnk3在金鱼斑马鱼组织特异性胚胎发育特异性表达状况.金鱼jnk3基因cDNA总长1 794 bp,其中阅读框1 293 bp,编码430个氨基酸.对jnk3基因序列及其推导的氨基酸序列进行同源性分析,结果显示,jnk3基因在脊椎动物较为保守,金鱼jnk3基因核苷酸序列与斑马鱼、人的同源性分别为94.1%80.7%,金鱼jnk3基因氨基酸序列与斑马鱼、人的同源性分别为99.7%93.4%.jnk3基因在鱼类成体中的表达存在着显著的组织差异,在金鱼斑马鱼脑精巢组织的表达具专一性,此外在斑马鱼心脏中也检测到jnk3的表达.RT-PCR检测结果显示,在鱼类胚胎发育中,神经胚期开始检测到jnk3基因mRNA表达,从神经胚到心跳期胚胎,jnk3基因表达水平逐渐增高,此后直至出膜一直保持较高的表达水平.研究表明,jnk3基因可能在鱼类后期的胚胎发育成体脑、精巢与心脏发育中具有重要作用....
摘要:湘云金鳙是本实验室经过近十年的工作选育出来的,该种鱼通体金红色,肉质鲜嫩,生长速度快,是一种很有价值的养殖鱼种实验材料.随机选取12尾湘云金鳙(RBC)12尾来自湘江流域的普通鳙鱼BC(作为对照)进行RAPD微卫星分析.在优化RAPD检测条件基础上,从230个随机引物中筛选出来的45个扩增较好且多态性强的引物对这两个群体的DNA多态性及分子标记进行了分析.结果显示在45个随机引物的扩增谱带中找到了2个引物(S20、S46)的特异扩增谱带,可以作为RBCBC间的分子遗传标记.普通鳙鱼群体内个体之间的遗传距离范围从0.04-0.13,群体内的平均遗传距离为0.075,而湘云金鳙群体内个体之间的遗传距离范围从0.02-0.35,群体内的平均遗传距离为0.139.这表明湘云金鳙群体遗传多样性明显强于普通鳙鱼群体.从32对微卫星标记中筛选9对微卫星标记用于两个群体24个个体的扩增.平均每个微卫星位点在湘云金鳙群体普通鳙鱼群体中检测到的平均有效等位基因数分别为2.441.89.普通鳙鱼群体的平均杂合度期望值(0.34)平均杂合度观测值(0.39)要比湘云金鳙群体的平均杂合度期望值(0.51)平均杂合度观测值(0.54)的小得多.由此可见,RAPD微卫星这两种方法得出的结果是一致的,普通鳙鱼群体的遗传多样性比湘云金鳙群体低.此外,通过RAPD微卫星对两种鳙鱼遗传多样性水平的分析,为鳙鱼种质保护提供科学证据,为鳙鱼良种选育提供了更多的遗传学背景资料....
摘要:不同物种之间的杂交往往存在不同程度的核质不相容,而导致其后代不育、不能存活以及表型上的不正常.近年来科研工作者也在核质不相容的方面开展了许多的相关研究,然而直接的实验相关的证据还是很少.团头鲂(2n=48)红鲫(2n=100)同属于鲤科,但分别隶属于鲌亚科鲤亚科.本实验将团头鲂红鲫进行人工远缘杂交,发现正交后代BRF1严重畸形并且致死,而反交后代RBF1成活.考虑到反交能存活后代RBF1的母本基因组远大于父本,而线粒体为严格意义上的母系遗传,所以核基因组与线粒体基因组之间的冲突相对较少.然而正交后代致死其母本核基因组远小于父本核基因组,所以我大胆猜想正交后代严重畸形且致死的重要原因之一可能是远大于母本的父本核基因组与母源性细胞质基因组之间不相容.为了验证我们的猜想,提取红鲫的心脏线粒体注射到BRF1的1-2细胞胚胎中,结果发现显微注射的父源性线粒体虽然没能改变BRF1因内脏裸露而致死命运,但却在很大程度上缓解了胚胎的畸形程度,有部分鱼苗甚至可以正常游动.因此,推测核质冲突在导致BRF1畸形能量供给方面有重要影响,而其最终致死是由于核质与核-核共同作用的的结果.
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