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摘要:介绍KM2A模拟软件的设计.该设计基于Geant4建立由6000多个探测器组成的LHAASO-KM2A阵列,模拟各探测器对广延大气簇射中次级粒子响应,并通过优化模拟流程大幅降低软件运行时的内存需求避免内存溢出,通过简化部分模拟大幅提高软件运行速度,使软件满足实际需求....
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北大核心 CSTPCD CSCD CA CBST
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摘要:目的 探讨缺氧对人牙周膜成纤维细胞基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)和组织金属蛋白酶抑制物(tissue inhibitors of matrix metalloproteinase,TIMP) mRNA表达的影响,以期为牙周组织修复再生机制研究提供依据.方法 组织块法培养人牙周膜成纤维细胞,分为缺氧组和常氧组(对照组).缺氧组细胞分别于1%O2、5% CO2、94%N2的37℃培养箱中培养12、24和48 h(分别为12、24、48 h缺氧组);常氧组细胞在20%O2、5% CO2、75%N2的37℃培养箱中培养.采用反转录聚合酶链反应技术检测MMP和TIMP相关基因的表达.缺氧组与常氧组间均数比较采用t检验,多组间比较采用单因素方差分析,两两比较采用LSD检验.结果 12、24、48 h缺氧组MMP-2 mRNA的表达呈明显递增趋势(分别为0.769±0.038、0.793±0.043、0.865±0.047),均显著高于常氧组(0.294±0.117),P<0.01;12h缺氧组TIMP-1,2 mRNA的表达(分别为1.870±0.645、0.862±0.043)均有一过性升高,均分别显著高于常氧组TIMP-1,2 mRNA的表达(分别为0.816±0.043、0.426±0.097),P<0.05.12h缺氧组MMP-1/TIMP-1 mRNA的比值(0.392±0.206)显著低于常氧组(0.859 ±0.126),P<0.05;24、48 h缺氧组MMP-2/TIMP-2 mRNA的比值(分别为1.091±0.207、1.264±0.377)均显著高于常氧组(0.695±0.255),P<0.05.结论 缺氧可以导致MMP-1、MMP-2、TIMP-1、TIMP-2 mRNA的表达,并使MMP-2 mRNA与TIMP-2 mRNA的比值失衡,这可能是缺氧导致牙周炎患者牙周组织破坏加重的机制之一....
[期刊论文] 侯超
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CSTPCD CA
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摘要:小整联蛋白结合配体N-连结糖蛋白家族是一组主要在牙和骨组织中表达的蛋白质,其基因具有通用的外显子内含子结构,影响细胞的增殖和分化。目前已知其包括骨桥蛋白、骨涎蛋白、牙本质基质蛋白-1、牙本质涎磷蛋白、细胞外基质磷酸糖蛋白和釉蛋白等6个成员,本文就其在牙发育过程中的作用作一综述。...
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北大核心 CSTPCD CSCD CA CBST
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摘要:目的 研究牙周膜相关蛋白1(periodontal ligament-associated protein-1,PLAP-1)在正常牙周组织及牙周膜细胞中的分布和表达,为进一步研究PLAP-1在牙周组织中的作用奠定基础.方法 用免疫组织化学、免疫细胞化学和反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术,对5只正常成年雄性SD大鼠磨牙牙周组织中PLAP-1的组织分布和牙周膜细胞mRNA的表达进行分析.结果 免疫组织化学结果表明,PLAP-1在牙周组织中强阳性表达于牙周膜,而在牙骨质、牙槽骨、牙龈中未见表达.免疫细胞化学结果显示,PLAP-1染色阳性细胞中着色定位于胞质中,胞核染色阴性.RT-PCR电泳结果显示350 bp处出现一条目的 条带,与PLAP-1 mRNA表达的预期结果相同,表明牙周膜细胞在mRNA水平表达PLAP-1.结论 在大鼠正常牙周组织中,PLAP-1在基因及蛋白水平均呈高表达且主要定位于牙周膜细胞中,PLAP-1是否参与调节胶原纤维的网络形成、牙周组织动态平衡等与牙周膜细胞密切相关的各种生理功能还有待进一步深入研究....
摘要:目的:检测人牙周膜细胞(human periodontal ligament cells,hPDLCs)在乏氧环境下乏氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)和血管内皮生长因子(vascular endothelia1 growth factor,VEGF)的表达情况.方法:组织块法培养人牙周膜细胞,第3代细胞用于实验,分2组分别在20%O2,5%CO2,75%N2(对照组)和1%O2,5%CO2、94%N2(乏氧组)的37℃培养箱中培养24h和48h.采用RT-PCR技术和免疫组化技术检测HIF-1α和VEGF的表达情况.应用SPSS13.0软件包进行t检验、单因素方差分析及LSD检验.结果:乏氧组HIF-1αmRNA的表达与对照组相比,差别无统计学意义.乏氧24h与48h VEGF mRNA的表达显著高于对照组(P<0.05).免疫细胞化学细胞爬片结果显示,乏氧组HIF-1α染色阳性,大量HIF-1α蛋白在胞核积聚,且表达量随乏氧时间增加而增加,而常氧组未观察到HIF-1α的表达;VEGF的表达呈时间依赖性增加,乏氧组VEGF的表达明显强于对照组.常氧48h后,VEGF呈微弱阳性表达.结论:乏氧可以改变人牙周膜细胞的代谢途径,上调HIF-1α及相关因子的表达....
摘要:成骨细胞主要介导骨形成,维持骨骼结构,并调控骨矿化和破骨细胞的活性,其分化、成熟对于骨重建具有重要影响.成骨细胞分化负性调控机制的阐明有利于疾病的预防与治疗研究,能够为疾病的治疗提供新的思路.本文对近年来成骨细胞分化负性调节因子的研究进展作一综述....
[博士论文] 侯超
口腔临床医学 山东大学 2018(学位年度)
摘要:舌鳞状细胞癌(TSCC)是口腔癌中最常见的类型,其特点是高转移和侵袭性生长的能力。以往研究表明,在不同的癌症类型中,包括TSCC,肿瘤相关microRNA的异常表达可能与肿瘤的发生、发展有关。MiRNAs通过RNA诱导的沉默复合体的作用,将miRNA分子与靶mRNA的3'非翻译区(UTR)结合来抑制靶基因的表达;这导致靶mRNA降解或抑制mRNA翻译。研究表明,原癌基因的激活和肿瘤抑癌基因的失活可能与舌鳞癌发病密切关联。然而,TSCC潜在的发生和发展相关的详细的分子学机制尚未阐明。因此,必须更深入了解调控舌鳞状细胞癌发病的相关机制,以期更有效防止疾病的发生及复发,最终提高患者的生存率。miR-509因其在人类许多常见肿瘤中的肿瘤抑制作用,已被确定为在肿瘤发生和发展中的一个关键调节因子。在本研究中,我们通过实时荧光定量PCR检测TSCC肿瘤组织和细胞系中miR-509的表达。通过MTT和侵袭实验分别评估miR-509对舌鳞癌细胞增殖和侵袭的影响。另外,我们通过实时荧光定量PCR、westernblot和双荧光素酶报告基因实验等一系列实验鉴定在TSCC组织中miR-509的直接靶基因。本研究发现,miR-509在舌鳞癌组织标本和细胞系(Tca8113,SCC-15,CAL-27)中表达下调,在体外过表达miR-509则抑制舌鳞癌细胞增殖,侵袭和转移。通过网络计算机预测软件预测在舌鳞癌组织中miR-509靶基因为表皮生长因子受体(Epidermal growth factorreceptor,EGFR)。下调EGFR表达能抑制TSCC肿瘤细胞的增殖和侵袭,其作用类似于过表达miR-509所引起的TSCC肿瘤细胞生物学变化。另外,在Tca8113和Cal-27中,过表达miR-509下调EGFRmRNA和蛋白的表达,且下调EGFR下游信号分子P-AKT和P-ERK1/2表达。EGFRmRNA在TSCC组织中高表达,miR-509在TSCC组织中低表达,Spearman相关分析显示在舌鳞癌组织中miR-509的表达与EGFR的表达呈负相关。总之,miR-509通过直接靶向EGFR可抑制舌鳞癌细胞增殖和侵袭,从而表明,miR-509/EGFR轴可能具有作为一种新的治疗舌鳞癌病人的靶向治疗方法的潜能。
  第一部分 miRNA-509抑制TSCC增殖、迁移及侵袭的体外实验研究
  目的:
  miR-509因其在人类许多常见肿瘤中的肿瘤抑制作用,已被确定为在肿瘤发生和发展的一个关键调节因子。本部分实验来检测miR-509异常表达所引起的舌鳞癌细胞的生物学变化。
  方法:
  1)通过荧光定量PCR检测miR-509在TSCC肿瘤组织及细胞系中的表达。
  2) MTT法检测过表达miR-509对TSCC细胞系(Tca8113,CAL-27)增殖的影响。
  3)Transwell小室迁移和侵袭实验分析过表达miR-509对TSCC细胞系(Tca8113,CAL-27)迁移和侵袭的影响。
  结果:
  1) miR-509在28个配对的TSCC组织及TSCC细胞系(Tca8113,SCC-15,CAL-27)中表达下调。
  2)在TSCC细胞系(Tca8113,Cal-27)中,过表达miR-509能抑制细胞增殖。在转染2天和3天后细胞增殖出现显著下降,差异均有统计学意义。
  3) Transwell小室迁移和侵袭实验显示,过表达miR-509显著抑制了Tca8113,Cal-27细胞的迁移和侵袭。
  结论:
  miR-509在TSCC肿瘤组织及TSCC细胞系(Tca8113,SCC-15,CAL-27)中表达下调。过表达miR-509抑制Tca8113,CAL-27的细胞增殖、迁移和侵袭,在TSCC中发挥抑癌基因作用。
  第二部分 鉴定直接靶向miR-509的靶基因
  目的:
  通过靶基因预测软件找寻TSCC中直接靶向miR-509的靶基因,在TSCC组织及细胞系中验证所选的靶基因EGFR其mRNA及蛋白表达是否受miR-509调节,并对相关机制做进一步分析。
  方法:
  1)应用靶基因预测软件microma.org(http://www.microrna.org)和TargetScan(www.targetscan.org)筛选可能直接靶向miR-509的靶基因,根据mirSVR值进一步筛选。
  2)通过Westernblot检测在TSCC细胞系(Tca8113,CAL-27)中转染miR-509模拟剂后EGFR蛋白及EGFR下游信号通路的关键分子(AKT、 P-AKT、ERKI/2、P-ERKI/2)的表达情况,并通过qRT-PCR检测转染miR-509模拟剂后EGFR mRNA的表达情况。
  3)通过双荧光素酶报告基因实验验证miR-509是否直接靶向EGFR mRNA的3'UTR端。
  4) RNA干扰分析沉默EGFR后是否能模拟miR-509过表达所引起的TSCC细胞系(Tca8113,CAL-27)的细胞增殖、迁移及侵袭能力下降改变。
  5) qRT-PCR检测EGFR在28对TSCC组织及正常组织中mRNA表达,通过Spearman相关分析评估在TSCC组织中EGFR mRNA表达与miR-509表达的相关性。
  结果:
  1)通过靶基因预测软件microma.org(http://www.microrna.org和TargetScan(www.targetscan.org),预测miR-509的靶基因为EGFR。
  2) Westernblot实验显示转染miRNAs模拟剂和阴性对照(miR-509mimics、miR-NC)72小时后,转染miR-509mimics组显著抑制Tca8113和CAL-27细胞中EGFR蛋白表达。过表达miR-509显著抑制EGFR下游的信号分子。在Tca8113和Cal-27中,过表达miR-509显著下调P-AKT和P-ERK1/2表达,但对AKT和ERK1/2表达无影响。qRT-PCR证实,转染miR-509mimics组下调Tca8113和CAL-27细胞中EGFR mRNA表达。
  3)双荧光素酶报告基因实验证实miR-509直接作用于EGFRmRNA的3'UTR端,从而抑制EGFR的表达。
  4)RNA干扰沉默EGFR后,Tca8113,CAL-27细胞增殖、迁移和侵袭均受到抑制,与过表达miR-509所引起的肿瘤细胞的生物学变化结果相似。
  5) EGFRmRNA在28对TSCC组织中高表达,Spearman相关分析显示EGFR mRNA和miR-509在TSCC组织中表达呈负相关。
  结论:
  1)过表达miR-509能下调TSCC细胞系(Tca8113,CAL-27)中EGFR的表达,且对EGFR下游信号通路有不同程度的抑制作用。
  2) EGFR mRNA的3'UTR端是miR-509的直接作用靶点
  3) miR-509通过负调控EGFR的表达而参与TSCC肿瘤的发生和发展。
[硕士论文] 侯超
税务 山东大学 2016(学位年度)
摘要:并购重组是公司资本运作的一种重要方式,是市场配置资源的有效手段。可以说,有市场的地方并购重组就必然会存在。改革开放以来特别是近年来,随着市场经济的深入发展、国民经济结构的战略调整以及全球金融危机,我国企业的并购活动越来越活跃。不可否认,公司并购重组在加强资源整合、调节存量资本、优化资源配置、提高企业整体竞争力方面发挥了非常重要的作用。
  尽管税收往往不是公司并购重组的主要驱动因素,但是任何并购重组都不能不考虑税收的影响,甚至,税收有时会成为并购重组能否成功的决定性因素。并购重组会涉及流转税、所得税等诸多税种,其中,以所得税最为复杂、对并购重组的影响最为广泛。所得税成本是并购成本的重要部分,影响着并购决策和支付方式选择等诸多方面。故并购重组中的所得税政策成为企业并购时的重要考虑因素。
  税收政策尤其是税收优惠政策,是国家意图的一种表达方式。从我国相继出台的一系列并购重组所得税政策可以看出,国家是鼓励和支持有利于资源优化配置的并购重组行为的。
  新企业所得税法实施以来,我国相继颁布了财税[2009]59号1、国家税务总局公告2010年第4号2等文件,并购重组所得税政策形成了一个比较完整的框架。近年来,随着财税[2014]109号3、财税[2014]116号4等政策的出台,并购重组所得税政策进一步完善。本文探讨的内容包括:这些政策构建的我国企业并购重组所得税政策框架是什么,与西方发达国家相比有何不同,我国有多少并购重组能够享受税收优惠待遇。
  分析发现,现行的并购重组所得税政策在促进企业重组方面并未达到预期,实际上能够享受到税收优惠的并购重组比例很小。究其原因是目前的并购重组所得税政策存在一些不足之处,例如法律层级低、缺乏体系性、免税并购适用范围窄、免税并购的比例要求高、相关规定缺乏可操作性、分税制阻碍跨地区并购重组等。
  针对以上问题,本文提出了我国公司并购重组所得税的完善建议:扩大免税并购的交易范围、提高并购重组相关法规政策的法律层级、适当降低免税并购的股权收购比例或者资产收购比例以及股份支付的比例要求,完善免税政策的税收立法等
  以前的研究大都站在企业立场上讨论如何在并购重组过程中进行税收筹划,以减少并购重组的税收成本。本文的研究视角是从政府角度出发,研究我国并购重组所得税政策的实际效——现实中有多少并购重组能够享受税收优惠待遇,目前的并购重组存在的问题以及完善相关政策的建议。
[硕士论文] 侯超
临床口腔医学 山东大学 2012(学位年度)
摘要:目的:
   结合上皮的根方迁移以及牙周韧带胶原纤维的降解导致牙周袋的形成是慢性牙周炎形成的主要特征之一。近年研究表明,在病理状态下,细胞外基质(extracellularmatrix,ECM)中的基质金属蛋白酶(matrixmetalloproteinaseMMPs)合成分泌增加,活性增强,导致牙周韧带、牙槽骨内的胶原纤维降解。因此,MMPs在牙周病的发病过程中起着关键作用。牙周炎、合创伤与吸烟都可以造成局部牙周组织的乏氧。乏氧环境对组织细胞有着重要的生物学影响,那么,乏氧是否影响该细胞对在牙周病时牙周组织破坏密切相关的MMPs/TIMPs的分泌从而在牙周病的病程中发挥重要作用,目前尚不清楚。因此本实验旨在乏氧环境下培养牙周膜细胞,模拟相当于牙周膜组织局部缺血的病理模型,探讨乏氧对牙周韧带成纤维细胞MMPsmRNA表达的影响,这将对缺氧状态下的牙周炎病理发病过程以及治疗方法的选择具有重要意义。
   方法:
   1.人牙周韧带成纤维细胞的分离培养及鉴定
   选取山东大学口腔医院口腔颌面外科门诊就诊的10~20患者,向患者及家属说明用途并征得同意后,搜集无龋坏、牙周组织健康的前磨牙,牙根已发育完成。牙齿拔除后立即放入含有双抗的D-Hank液中保存。转运到事先消毒好的超净台内,经瓶内牙齿用含有双抗的D-Hank液充分冲洗三次,无菌条件下用手术刀刮取牙根中下部分的牙周膜组织,采用组织块法进行人牙周韧带细胞的原代培养,细胞增殖达培养瓶面积的90%后细胞传代,第3代细胞用于细胞来源鉴定,第5代细胞用于实验。ABC法免疫组化染色鉴定人牙周韧带成纤维细胞的来源。
   2.实验分组常氧组(对照组):人牙周韧带成纤维细胞在20%O2、5%CO2、75%N2的37℃培养箱中培养;乏氧组:牙周膜细胞分三组在1%O2、5%CO2、94%N2的37℃培养箱中分别培养12h,24h和48h。
   3.RT-PCR检测人牙周韧带成纤维细胞MMPs和TIMPs的表达
   将生长状况良好的第5代细胞接种于6孔培养板中,在乏氧和常氧条件下培养。在12h,24h,48h各取一块6孔板,每个培养皿的细胞加2mlPBS冲洗2次,弃掉冲洗液。每个培养孔加入1mlTrizol,吹打,收集裂解液,-80℃低温保存,备用。Trizol两步法分别提取细胞总RNA,采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测MMP-1,MMP-2,MMP-9,MMP-13,TIMP-1,TIMP-2的基因表达情况,并用软件进行半定量分析。
   结果:
   1.乏氧12h,24h,48h人牙周韧带成纤维细胞MMP-2,TIMP-1,TIMP-2mRNA的表达高于对照组;乏氧48hMMP-1mRNA的表达高于对照组。
   2.乏氧组MMP-2mRNA的表达呈明显递增趋势,与对照组相比差异具有显著性(P<0.01)。
   3.乏氧12h组MMP-1mRNA表达有一过性降低,随着乏氧时间延长,其表达增加。乏氧12h组与常氧组相比差异无统计学意义。
   4.乏氧12h组TIMP-1mRNA和TIMP-2mRNA表达有一过性升高,与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05)。随着乏氧时间延长,其表达与对照组相比增加不明显。乏氧组内TIMP-1mRNA和TIMP-2mRNA的表达呈递减趋势。
   5.实验中未检测到MMP-9,13mRNA的表达,结果未显示。
   6.乏氧48h后MMP-1/TIMP-1mRNA的比值变化较常氧组不明显,但乏氧12h组MMP-1/TIMP-1mRNA的比值明显降低,与对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。乏氧组组内MMP-1/TIMP-1mRNA的比值变化显著,表达呈明显递增趋势。
   7.乏氧12h,24h,48h组MMP-2/TIMP-2mRNA的比值较常氧组明显上升,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。
   结论:
   乏氧可以导致MMP-1,MMP-2,TIMP-1,TIMP-2的表达,并使MMP-2/TIMP-2的表达失衡,推测MMP-2/TIMP-2表达失衡途径可能是乏氧导致牙周炎时牙周组织破坏加重的机制之一。
[硕士论文] 侯超
软件工程 山东大学 2009(学位年度)
摘要:经济全球化发展,使得企业迫切需要能够整合员工、生产状况等经营信息的工具,以提高自己的经营实力。人力资源管理是近年兴起的对企业信息资源进行管理的有效思想和工具,并以此为手段来提高企业的获利能力。经过分析本行业的实际需求,结合人力资源管理的思想,设计实现了一个员工管理系统。 首先,本文在讨论员工管理系统项目背景和对其开发设计所面对问题的基础上,分析了系统的功能需求,并对系统需求以流程图和用例图的形式来详细说明。在此基础上分析了系统的业务流程,并进行了流程改进和系统化工作,分析了管理系统的开发思路。 然后我们进行了员工管理系统架构设计。根据系统需求提出系统设计目标和原则,分别对系统技术架构和功能架构进行了设计。技术架构主要考虑系统的可扩展性,可维护性以及性能问题,采用分层模型的架构,对各层的功能进行了设计分析。讨论了系统各部分的功能组成,给出一个动态的系统功能流程。 再一步进行员工管理系统的架构设计。该部分系统架构层次设计,对分层架构进行了描述。在系统建模中,为了更加充分的理解管理系统的架构设计,我们简单介绍了微软常用的三层架构系统,分析了其优缺点,并介绍了我们设计的系统架构的特点、作用。然后给出了员工管理系统的整体结构图。在了解了整体结构之后,分别讨论了各个模块的详细设计。在详细设计中,利用状态图和交互图进行设计分析,着重对各模块进行了类的描述,给出了详细设计图。 第四部分,我们在详细设计的基础上,首先对各个模块的实现进行了细致的介绍,给出了系统的整体效果图和各个部分的实现。举例说明整个系统的运行过程。最后,本文对员工管理系统的应用情况作了简单介绍,并对系统进一步改进提出了建议。 综上所述,我们在分析业务需求和思想的基础上,设计并实现了针对本行业的员工管理系统。
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