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摘要:本研究用ELISA直接法分别检测新鲜心包组织、新鲜皮肤组织及新鲜骨组织中α-Gal抗原含量分别为1.076±0.2045 U/mg、3.247±0.2370 U/mg和14.53±0.3048 U/mg,组间差异有统计学意义(P<0.05)。ELISA法检测牛松质骨、经过初步处理的牛骨以及处理完成的成品骨中α-Gal抗原含量,三种组织中α-Gal抗原含量分别为14.53±0.3048 U/mg、11.62±1.065 U/mg和1.546±0.3857 U/mg,组间差异有统计学意义(P<0.05)。结果表明,ELISA直接法能够方便快捷的检测异种移植材料中α-Gal抗原含量,并且结果可信,可以为异种移植材料中抗原含量评价提供依据。...
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北大核心 CSTPCD CSCD CA CBST
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摘要:目的 探讨异黄酮类化合物乙酰葛根素对脑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制.方法 采用大脑中动脉阻塞法(MCAO)制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型.测定脑组织超氧化物歧化酶活性、丙二醛的含量和总抗氧化能力,并进行神经生物学评分.结果 乙酰葛根素能使脑缺血大鼠的神经功能缺损评分明显低于缺血再灌组(P<0.01).乙酰葛根素能明显降低缺血再灌注损伤后脑组织中的丙二醛含量,提高超氧化物歧化酶活性和总抗氧化能力.氯化三苯四氮唑染色显示,缺血再灌组在大脑皮质、基底节等均出现梗死灶.乙酰葛根素对缺血性脑梗死有改善作用.结论 乙酰葛根素具有脑保护作用,其作用机制可能与抗氧自由基、抗脂质过氧化作用有关....
[期刊论文] 赵俏静 侯丽
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北大核心 CSTPCD AJ CA
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摘要:1997年9月~2004年2月,我们对7例气管内肿瘤患者于全麻下行肿瘤切除术,效果较好.现将护理体会报告如下....
摘要:目的:探讨乙酰葛根素在脑缺血再灌注损伤后对一氧化氮(NO)和内皮素(ET)生成的影响.方法:采用大脑中动脉内栓线阻断法造成大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤(假手术组除外)后,随机将实验大鼠分为6组,连续灌胃给药10 d:损伤组[生理盐水5 ml/(kg·d)];对照组[葛根素50 mg/(kg·d)];乙酰葛根素高、中、低剂量组[乙酰葛根素250、50、10 mg/(kg·d)];假手术组[生理盐水5 ml/(kg·d)].采用生化法测定脑缺血1 h再灌注24 h及48 h大鼠脑组织匀浆和血清中NO水平,用放射免疫法测定血浆中ET水平,并进行脑组织病理学检查.结果:损伤组大鼠脑缺血1 h再灌注24 h及48 h,脑组织匀浆和血清NO、血浆ET水平均明显高于假手术组(P<0.01);与损伤组相比,高、中、低剂量乙酰葛根素组血浆ET及脑组织匀浆NO水平显著降低(P<0.05),血清NO再灌注24 h也明显降低(P<0.01);高、中剂量乙酰葛根素组再灌注48 h血清NO显著降低(P<0.01).结论:乙酰葛根素可减少脑缺血再灌注损伤后期不同时间段NO和ET的生成,提示,乙酰葛根素对局灶性脑缺血灌注损伤具有一定的保护作用....
摘要:2002年5月~2004年11月,我院对33例反射亢进性神经源性膀胱患儿行改进手术治疗,取得满意效果,现将护理体会报告如下....
摘要:目的: 构建共表达质粒pSLC-IRES-IL-2,并在COS-7细胞中表达.方法: 根据人SLC和IL-2 cDNA的序列分别设计、合成引物,构建以内部核糖体进入位点(IRES)相连的SLC和IL-2基因的真核表达质粒pSLC-IRES-IL-2,用电穿孔法以共表达质粒转染COS-7细胞.用Western blot检测SLC和IL-2的表达.结果: Western blot检测表明,以重组共表达质粒pSLC-IRES-IL-2转染的COS-7细胞能表达SLC和IL-2,表达产物的Mr同预期的结果相一致.结论:成功地构建SLC和IL-2基因的共表达质粒,以其转染COS-7细胞后,能分泌性表达SLC和IL-2,为肿瘤基因治疗的研究提供一定途径....
摘要:目的:构建小鼠次级淋巴组织趋化因子(mSLC)高效真核细胞表达载体pVAX1-mSLC.方法:用BamH Ⅰ和Xba Ⅰ双酶切重组克隆pMD-mSLC,胶回收约410 bp的SLC基因片段,以亚克隆法构建于真核表达载体pVAX1的相应酶切位点.转化后进行菌落PCR分析和HinDⅢ酶切鉴定.阳性克隆提取质粒,体外电穿孔法转染COS-7细胞,用Western blot检测转染细胞中mSLC的瞬时表达.结果:菌落PCR和HinDⅢ酶切鉴定证实,mSLC基因片段正确插入到真核表达载体pVAX1中.Western blot检测表明,以重组质粒pVAX1-mSLC转染的COS-7细胞能表达mSLC,表达产物的相对分子量同预期的结果相一致.结论:成功地构建小鼠SLC基因的真核表达质粒pVAX1-mSLC,用它转染COS-7细胞后,能瞬时表达mSLC,为下一步mSLC的肿瘤基因治疗研究奠定了基础....
摘要:为了构建可在哺乳动物细胞内高效表达人次级淋巴组织趋化性细胞因子(hCCL21)的真核表达质粒pVAX1-hCCL21,以便用于hCCL21基因治疗研究.以BamH Ⅰ和Xho Ⅰ双酶切重组克隆pSK-hCCL21,胶回收约540 bp的hCCL21目的基因片段,以亚克隆法构建于真核表达载体pVAX1的相应酶切位点,转化后进行菌落PCR分析和BamHⅠ、XhoⅠ双酶切鉴定.阳性克隆提取质粒,体外电穿孔法转染COS-7细胞,Western blot法检测转染细胞中hCCL21的瞬时表达,趋化小室法检测表达产物对淋巴细胞的免疫趋化作用.结果显示,菌落PCR和酶切鉴定证实,目的基因hCCL21正确插入到真核表达载体pVAX1中,转染COS-7细胞后,细胞培养上清及裂解产物中可检测到重组蛋白hCCL21的表达,并且表达产物对人外周血单个核细胞有明显的趋化活性.已成功构建了可在哺乳动物细胞内高效表达hCCL21基因的真核表达质粒pVAX1-hCCL21,为进一步研究hCCL21基因治疗肿瘤奠定了基础....
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北大核心 CSTPCD CSCD CA CBST
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摘要:目的观察乙酰葛根素对大鼠急性局灶性脑缺血再灌注损伤的NO保护作用.方法采用大脑中动脉内拴线阻断法(MCAO)造成大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,测定脑组织匀浆和血清中NO含量及NOS水平的变化,并进行病理组织学观察.结果脑缺血再灌注24,48 h后,模型组脑组织匀浆中NO,NOS活性及血清中NO水平较对照组均有显著性升高(P<0.01),给药组能降低其水平,且与模型组相比有显著性差异(P<0.05).结论乙酰葛根素能通过降低NO毒性,发挥脑保护作用,减轻缺血再灌注损伤....
摘要:目的:探讨葡萄糖神经酰胺合成酶(glucosylceramide synthase,GCS)基因在人乳腺癌细胞的表达及意义.方法:体外培养人耐阿霉素乳腺癌细胞MCF-7/ADR和人敏感乳腺癌细胞MCF-7,MTT法检测MCF-7/ADR细胞耐药倍数,RT-PCR法检测两种细胞GCSmRNA的表达,免疫细胞化学法检测GCS蛋白表达水平.结果:MCF-7/ADR细胞耐药倍数为53倍,RT-PCR检测结果显示两种细胞均有GCSmRNA表达,且MCF-7/ADR细胞GCS mRNA表达水平较MCF-7细胞有显著升高(P<0.05),免疫细胞化学结果显示二者GCS蛋白均有表达且表达水平有显著差异(P<0.05).结论:GCS基因在乳腺癌细胞中表达,GCS对于乳腺癌的发生发展具有重要作用,GCS在耐药乳腺癌细胞的高表达证明GCS与肿瘤耐药密切相关,为肿瘤耐药的逆转治疗提供了新的方向....
摘要:次级淋巴组织趋化因子(SLC)是体内重要的趋化因子,高表达于次级淋巴组织,通过与细胞表面受体结合,趋化并活化T淋巴细胞、天然杀伤细胞和树突状细胞等免疫效应细胞,在机体抗感染和抗肿瘤免疫中具有重要的调节作用.现综述SLC的生物学特性,并重点阐述SLC的抗肿瘤机制和在肿瘤治疗中的研究进展....
摘要:次级淋巴组织趋化因子(secondary lymphoid tissue chemokine,SLC)是重要的CC趋化因子,对多种免疫细胞特别是T淋巴细胞、树突状细胞(dendritic cell,DC)及NK细胞具有趋化作用.研究证实,SLC通过募集T淋巴细胞、DC和NK等免疫效应细胞到肿瘤组织、促进细胞因子的释放以增强肿瘤局部非特异性免疫以及抑制肿瘤血管生成等作用,达到其显著的抗肿瘤效果,是目前肿瘤免疫治疗的理想效应分子.为了进一步探索SLC在肿瘤基因治疗中的应用,我们构建了小鼠SLC基因的真核表达载体pVAX1-mSLC,为今后开展体内基因治疗肿瘤奠定基础....
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北大核心 CSTPCD AJ CA
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摘要:患者女,33岁,因双胎剖宫产后(G2P2L2)阴道流血61天,腹痛1天,加重2小时,于2003年10月11日10日22时入院....
摘要:一直以来,社会治安问题都是重大的政治问题与社会问题。然而,在当前,职业警察作为单一主体独立提供公共治安服务已完全不能满足社会公众需求,这就要求政府创新公共治安服务供给,通过治安服务的多元化治理实现治安的“无增长改善”。而治安服务的契约治理为实现治安服务多元治理、治安状况的无增长改善提供了一条可行途径,它能够通过契约治理的方式整合社会中存在的零散资源,并使这些零散资源组合形成合力,实现治安服务的多元治理。...
摘要:一直以来,社会治安问题都是重大的政治问题与社会问题。然而,在当前,职业警察作为单一主体独立提供公共治安服务已完全不能满足社会公众需求,这就要求政府创新公共治安服务供给,通过治安服务的多元化治理实现治安的“无增长改善”。而治安服务的契约治理为实现治安服务多元治理、治安状况的无增长改善提供了一条可行途径,它能够通过契约治理的方式整合社会中存在的零散资源,并使这些零散资源组合形成合力,实现治安服务的多元治理。...
摘要:[目的]观察早期护理干预预防骨科糖尿病病人术后深静脉血栓形成(DVT)的效果.[方法]将114例糖尿病合并骨折病人随机分为观察组和对照组,每组57例,对照组进行常规护理,观察组在常规护理的基础上,采取早期护理干预.观察并比较两组病人DVT发生情况.[结果]观察组病人未发生DVT,对照组发生7例,两组比较有差异统计学意义(P<0.05).[结论]早期护理干预能有效预防骨科糖尿病病人术后并发DVT....
[硕士论文] 侯丽
行政管理 山东大学 2015(学位年度)
摘要:城市化是推动社会发展的重要力量之一,随着城市化进程的飞速发展,城市居民对原有城市公共品及更高层次城市公共品的需求也发生了巨大的变化。在这种形式下,传统的以政府为主导进行投资、生产、供给的公共品供给模式已经遇到了困境,并已成为引发社会不稳定的潜在因素和制约城市持续、健康、长远发展的重要问题。为了从根源探讨解决城市公共品的供需均衡问题,本文选取了需求导向这一新的视角,通过对城市居民的公共品需求的相关分析,借助于需求管理这一过程实现城市公共品的供需均衡。从而为城市的健康、持续发展提供一定帮助。
  了解城市公共品需求是实现城市公共品供需均衡的重要前提,因此本文首先对公共品、公共品需求的相关内容进行了概述,在此基础上进一步论证了公共品需求与城市产生、发展二者的关系,在辩证看待二者关系的同时本文也总结界定出城市公共品的概念及特性。随后文章又深入分析了公共品需求层次、当前城市公共品需求所处的层次以及影响需求层次的因素、城市公共品需求的满足分析。这样基本完成了对城市公共品需求的一个较为完整的分析。
  实现城市公共品供需均衡的必经途径就是在了解需求的基础上,完成有效地公共品供给。本文在对城市公共品需求做了相应分析后再次转入现实视角,综合分析研究了存在的公共品供给机制,深入研究了我国公共品供给机制的历史演变、存在问题及问题产生原因。这样文章基本就完成了对于城市公共品需求与供给的相关分析并客观呈现出二者的对比之势,需求与供给存在何种差距?二者如何达成均衡?
  文章的最后一章既是顺应行文思路对前文呈现问题的探讨,更是研究主题的最终升华,着力分析怎么样通过完善的需求管理过程来构建理想的城市公共品供给机制。该部分通过对城市公共品需求表达、城市公共品需求识别及城市公共品供给决策与执行这样三个方面的阐述,来呈现出了怎样构建以需求为导向的城市公共品供给模式,从而实现供需均衡。
摘要:为了探索BALB/c鼠脾脏T淋巴细胞转化试验的最佳培养条件,采用四甲基偶氮唑(MTT)比色法,对脾细胞浓度和刀豆蛋白A(ConA)的浓度两个参数进行研究.结果表明,在本次实验条件下,采用5×105个/ml细胞、2.5μg/ml的ConA可获得最大的吸光度(A)值,两个因素间存在明显的交互效应....
[博士论文] 侯丽
生物化学与分子生物学 山东大学 2012(学位年度)
摘要:研究背景:
   昆虫是地球上种类最多,数量最大的生物种群,与人类有着密不可分的关系。昆虫的发育是由激素调控的复杂的生命过程,包括昆虫的蜕皮与变态。在全变态昆虫中,蜕皮过程包括幼虫之间的蜕皮,幼虫到蛹的蜕皮以及蛹到成虫的蜕皮。幼虫向蛹的转变被称为变态。昆虫的变态是受蜕皮激素(20E)和保幼激素(JH)共同调控的。在幼虫期,20E引发蜕皮,JH负责维持个体的幼虫状态;而在幼虫的末龄期,JH滴度逐渐降低甚至消失,20E则起始变态过程。目前对于20E及JH协调调控变态的机制已经有了比较深入的研究。但最近的研究表明,除了20E与JH两种激素外,胰岛素(insulin)在昆虫的变态中起着不可忽视的作用。研究发现,insulin与20E存在着相互作用,二者共同的调控昆虫的生长及变态决定。但二者相互作用的分子机制尚不清楚,有哪些分子参与了两个通路的相互作用,还有待进一步研究。
   昆虫的变态过程中伴随着组织的重建,例如,中肠和脂肪体。在变态时期,幼虫的组织要发生解体,成虫的组织重新形成,这一过程也是由20E与JH共同调控的。20E诱导程序性细胞死亡使幼虫组织降解,而JH则拮抗20E的功能。然而,组织的重建过程是一个复杂的生理过程,除了激素的调控外,还依赖于其他的活性分子。但目前对于参与组织重建效应分子的研究还不深入。小GTP酶Rab蛋白在哺乳动物中广泛参与了各种生理活动,包括膜泡运输,细胞骨架活性及信号转导等生理过程,但在昆虫发育过程中对于该类蛋白的研究还很有限。此外,蛋白激酶C作为一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶可以通过促进底物蛋白磷酸化调节多种生理过程,如细胞生长与增殖,细胞凋亡等。有研究发现蛋白激酶C参与昆虫20E信号转导过程,但哪种蛋白激酶C参与20E的信号转导还有待研究。
   存在的科学问题:
   本实验室通过对棉铃虫变态期转录组进行测序,鉴定到两种小GTP酶Rab4b,Rab32及一种蛋白激酶Cdelta(PKCδ)基因。拟解决的科学问题为:Rab4b,Rab32是否参与由激素调控的变态过程?在功能上有何差异?PKCδ是否参与20E调节的变态及其伴随的组织重建过程?
   研究意义:
   本研究通过鉴定三种参与变态过程的关键分子,阐明了不同分子的具体功能,从分子水平上揭示激素调控变态的分子机制,为进一步研究昆虫发育提供依据。此外,本研究通过鉴定参与组织重建的效应分子,丰富了我们对于组织重建机制的认识和理解,为农业害虫的防治提供了理论指导。
   研究方案及取得的成果:
   本文以鳞翅目昆虫,棉铃虫,为实验材料,通过体内,体外的干扰实验及激素调控实验来探索两种Rab蛋白Rab4b,Rab32及蛋白激酶Cdelta(PKCδ)在昆虫变态及组织重建中的功能。所得实验结果如下:
   1.Rab4b参与insulin与20E信号通路的基因转录进而调控糖原水平及变态发生
   本研究在棉铃虫鉴定到一个小GTP酶Rab4b参与了20E与胰岛素调控的基因转录。该基因在表皮、中肠、脂肪体及血淋巴中均有表达。虫体RNA干扰导致幼虫在化蛹前死亡,异常化蛹及小蛹的形成。生化分析结果显示,干扰Rab4b后,糖原的储存水平下降;体内及体外干扰实验表明,20E通路中的Br和HR3以及糖原合成酶GS的转录水平受到抑制,而FOXO的转录水平上调。免疫细胞化学及免疫印迹的结果表明,insulin通过Rab4b抑制FOXO的核定位,过表达Rab4b进行亚细胞定位检测,发现insulin没有影响Rab4b定位,而20E刺激后Rab4b向细胞膜迁移。但在mRNA水平上,20E不影响Rab4b的表达,而胰岛素则诱导Rab4b的上调。暗示20E与胰岛素信号通路通过不同的方式来调控Rab4b,最终调控变态的发生。
   2.Rab32参与棉铃虫变态期中肠的重建
   我们从棉铃虫中肠中鉴定到Rab32基因。半定量RT-PCR分析Rab32表达模式发现该基因在预蛹期的中肠mRNA水平最高。20E诱导Rab32上调,而JH类似物(JHA)不影响其转录。在表皮细胞系中干扰20E核受体EcR-B1后,20E对Rab32的上调作用消除。免疫细胞化学结果显示,该蛋白主要位于细胞质中,而20E使Rab32在细胞系中聚集颗粒状结构并增加Rab32在细胞质中的蛋白表达。免疫组织化学结果显示,在变态期的中肠中,Rab32定位与成虫中肠上皮细胞的内部边缘位置,暗示其可能参与中肠形成中营养的吸收及信号转导的作用。在虫体内干扰Rab32后,幼虫的生长及变态没有受到影响,但成虫中肠的形态发生异常。这些结果说明Rab32参与了棉铃虫变态期的中肠重建,Rab32可能在20E信号途径的调控下参与成虫中肠的形成。
   3.蛋白激酶Cdelta(PKCδ)参与棉铃虫变态期组织的解体
   本研究在棉铃虫中发现了一个新型的蛋白激酶C,PKCδ,参与了变态期中肠和脂肪体的凋亡。PKCδ在棉铃虫的表皮、中肠、脂肪体中均有表达,且在变态期转录水平较高。体内注射激素实验结果显示,20E和JHⅢ都可以上调PKCδ的转录,。在细胞系上干扰EcR-B1后,20E不能上调PKCδ,而干扰JH的候选受体Met后,JHⅢ对PKCδ的诱导作用没有变化,说明20E通过EcR-B1周控PKCδ,而JHⅢ可能通过其他的方式,而不是Met来调控PKCδ转录。在虫体中干扰PKCδ,中肠和脂肪体无法进行解体和重建;凋亡相关基因Caspase8的表达被抑制,而凋亡抑制因子Survivin转录上调。在表皮细胞中过表达PKCδ的功能域,可以诱导细胞凋亡,并增强了FOXO的核定位,说明PKCδ可能通过调节FOXO的转录活性诱导凋亡。在表皮细胞中干扰PKCδ,抑制了20E及JHⅢ对USP1,Calponin等关键基因的上调作用,说明PKCδ可能参与了20E与JH的信号转导途径的相互作用。
   所取得成果的创新点与意义:
   本文主要通过体内及体外的RNA干扰技术,鉴定到一个小GTP酶Rab4b通过调控20E与胰岛素通路基因转录及糖原合成进而参与变态。深入揭示了20E通路与胰岛素通路相互作用的机制。同时,我们鉴定到另一种小GTP酶Rab32参与了中肠重建中成虫中肠的形成,丰富了小GTP酶Rab蛋白在昆虫中的功能研究。此外,发现蛋白激酶Cdelta(PKCδ)参与了20E诱导的组织凋亡及20E与JH对下游基因的调控,本研究为深入揭示昆虫变态的激素调控及组织重建的分子机制提供了依据。
摘要:目的探讨化合物N-2211对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用.方法应用大脑中动脉阻塞再灌模型(MCAO),观察并对比脑缺血大鼠给药组和模型组的指标.结果化合物N-2211灌胃给药能使脑缺血大鼠的神经行为明显改善,脑梗死面积显著降低;该药还能提高组织清除羟自由基的能力,高、中、低三个剂量组与缺血模型组相比均有显著性差异.结论化合物N-2211具有脑保护作用,其作用机制可能与抗氧自由基作用有关....
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