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摘要:目的 观察Pluronic F-127水凝胶的理化性质,并遴选最佳的浓度,探讨其作为骨髓间充质干细胞(BMSCs)载体的生物相容性.方法 制备10%、20%、30%(m/v)的Pluronic F-127水凝胶,分析其成胶性能及溶胀率,在扫描电镜(SEM)下观察不同浓度水凝胶的微观形态.不同浓度水凝胶包含BMSCs及转化生长因子(TGF-β1)后共培养7d,经细胞计数试剂盒-8(CCK-8)定期检测不同载体内BMSCs增殖生长状况.筛选出较佳的Pluronic F-127浓度,加入诱导液对BMSCs进行多向诱导分化,分别进行油红-O及茜素红-S染色且根据染色结果评价细胞诱导分化的效果.结果 Pluronic F-127水凝胶的成胶时间与其浓度呈负相关,且浓度越高的初始成胶温度较低,更易成胶.Pluronic F-127水凝胶浓度较高,其微观结构较致密,相应的溶胀率较低.CCK-8结果证实20%的水凝胶与10%比较,对BMSCs增殖的抑制作用更大,第5天最为明显,20%组吸光度(A)值(0.302±0.045)显著低于10%组(0.571±0.081,t=5.120,P<0.05),而在凝胶载体中加入TGF-β1则对细胞的增殖有促进作用,第5天20%*组(加入TGF-β1)A值(0.454±0.034)明显高于20%组(0.302±0.045,t =6.088,P<0.05).成脂及成骨诱导后可以看到有脂滴及钙化点成分着色.结论 20%浓度的Pluronic F-127可作为支持BMSCs增殖及分化的合适载体,且复合生长因子或诱导液会更有利于细胞进一步生长分化....
摘要:目的 以血清药物化学结合现代色谱技术,对健脾化湿解毒方的质量标准做初步的研究,并观察健脾化湿解毒方体内可能的抗肿瘤成分.方法 采用液质联用法,建立并测定复方健脾化湿解毒方制剂,确立其中6种有效成分的指纹图谱的色谱洗脱条件,对比大小鼠在不同给药浓度下及生理病理状态下血清中药物成分的吸收变化.结果 基于LC-MS建立了同时测定药液中6种成分的色谱方法,测定了生理状态下大鼠及小鼠,以及病理状态下小鼠血清中6种成分的浓度.结论 该方法适用于健脾化湿解毒方的质量控制;大鼠更适用于该中药复方的血清药理学研究;小鼠在大肠癌肝转移(CRLM)征状态下对药液中槲皮素的增量吸收,表明了该复方制剂某成分体内抗肿瘤特性....
摘要:Hippo信号通路在结直肠癌发生发展中具有重要作用,是调控细胞增殖和分化的重要信号通路.Hippo信号通路中多种蛋白和基因尤其是下游的YAP在结直肠癌的发生、转移、耐药、复发中发挥重要作用.YAP及相关基因可作为预测结直肠癌放化疗药物耐药性的靶向标志物.针对Hippo信号通路基因网络的靶向治疗与联合用药为治疗结直肠癌提供了新的思路....
摘要:组织工程气道重建是利用原生、异体或人工合成等不同的材料,结合种子细胞及生长因子,修复缺损气道并恢复其生理功能的气管替代治疗方法.而移植物支架的选择是影响气道重建成功与否的关键所在.通过改善移植物支架性能,使其拥有与天然气管相似的机械特性与生物相容性,并促进其血管化和再上皮化,降低免疫原性,进而完成气道重建.本文旨在就气道重建中移植物支架的研究进展作一综述....
摘要:目的 通过对3D打印材料与脱细胞基质的生物相容性研究,分析两种基质材料的相对优缺点,为构建更为合理的组织工程气管提供依据.方法 取2个月龄新西兰兔胫骨骨髓,采用全骨髓贴壁筛选法分离培养骨髓间充质干细胞(BMSCs).取10只6个月龄成年新西兰兔气管,修剪至每段1.5 cm,随机分为原生气管组(A1,n=5),剥离气管外表面疏松结缔组织;脱细胞气管组(B1,n=5)采用脱氧胆酸钠联合酶法脱细胞7个周期获取;利用3D打印技术制备聚己内酯(PCL)管型支架,并行纳米二氧化硅修饰处理(C1,n=5).测量各组气管基本形态及生物力学性能.取第4代BMSCs制备细胞-支架复合物,培养48 h时行Giemsa染色观察材料周围的细胞活性;CCK-8及扫描电子显微镜(SEM)检测细胞增值及黏附性能.取15只6个月龄成年新西兰兔,随机分成原生组(A2,n=5)、脱细胞气管组(B2,n=5)和PCL气管组(C2,n=5),分别于颈背部皮下皮囊埋植3组支架.术后动态分析血清免疫球蛋白IgM和IgG变化,术后30 d行HE染色观察以及免疫组化评估支架炎症反应情况.结果 3组气管在宏观形态上基本一致,生物力学性能C1要优于B1组.Giemsa染色:B1组周围细胞生长情况优于C1组;SEM检测:细胞在脱细胞及PCL支架上均增殖附着良好;CCK-8:脱细胞气管支架组细胞增殖情况优于其他两组;体内埋植实验测血清IgG、IGM提示C2组炎症反应在急性期最为明显;术后可见A2、B2组表面结缔组织包裹明显,而C2组结构保持相对完整,HE染色提示A.组的炎症细胞以单核细胞、浆细胞等浸润为主,C2组炎症的反应以嗜酸性粒细胞浸润为主,而B2组炎症细胞浸润最少;免疫组化CD68染色提示B2组、C2组巨噬细胞浸润均不明显.结论 3D打印材料的生物力学性能较脱细胞材料更好,但脱细胞气管基质材料生物相容性更优....
[专利] 发明专利 CN201910122543.3
扬州大学 2019-05-31
摘要:本发明公开了一种纳米二氧化硅修饰的3D打印气管支架及其制备方法,所述3D打印气管支架以PCL材料制成,该3D打印气管支架的孔径为200µm,本发明公开的制备方法具体包括多孔气管支架的制备和PCL支架的纳米二氧化硅修饰两个步骤,经纳米表面修饰后的3D打印PCL气管支架具有优良的生物力学性能,同时其生物相容性利于细胞的贴附和生长,体内埋植实验证实其具有用于组织工程气管重建的理想材料的前景。
摘要:当气管缺损超过成人气管总长度的50%以及婴儿气管长度30%以上时往往需要人工气管来修补.现已被采用的气管替代方案,包括自体移植物、同种异体移植物、假体或其组合等,均具有包括炎症、感染等的局限性.随着近年来组织工程(TE)的快速发展,研究人员开始着手利用由聚合物或同种异体移植物制成的支架来修补气管缺损.鉴于上皮在气管中至关重要的作用,气管移植物上皮化已逐渐成为组织工程气管重建研究的重点,本文将结合目前组织工程气管上皮化的相关研究进行综述....
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