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CSTPCD CSCD CA CBST
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摘要:目的 探讨不育患者精液pH值与精液参数的相关性,为男性不育症的诊断与治疗提供临床依据.方法 将2014年4~9月就诊的122例男性不育患者予pH计检测精液pH值、计算机辅助的精液分析系统(CASA)分析精液常规参数、流式细胞仪分析精子DNA碎片指数(DFI)、ELISA检测精浆弹性蛋白酶,分析精液pH值与精液参数、DFI及精浆弹性蛋白酶等的相关性.结果 不育患者精液pH值5.5 ~8.2,精液pH值与精子浓度呈正相关(r=0.244,P<0.05),与精浆弹性蛋白酶也呈正相关(r =0.190,P<0.0S),而与精液量、前向运动精子百分率、精子活动率、DFI及正常形态精子百分率均无相关性(P>均0.05).结论 不育患者精液pH值和精子浓度及精浆弹性蛋白酶均呈相关性,提示精液pH值的准确测定可能对男性不育的诊断和治疗有一定临床意义....
[硕士论文] 丁晓萌
生物学;发育生物学 南京师范大学 2016(学位年度)
摘要:下丘脑弓状核中合成的神经肽Y(Neuropeptide Y)是一种强摄食物质,它参与调节食物的摄取、心率、血管收缩、呼吸运动、平滑肌舒缩以及下丘脑神经内分泌等重要生命活动功能。有研究表明,NPY除了参与调节以上重要活动的能量代谢,也参与了生殖活动的调控。NPY蛋白不仅表达于下丘脑与生殖调控相关区域,在垂体水平也有报道参与LH峰的形成。另有研究发现在性腺、生殖管道均有NPY神经纤维的分布,在卵泡液中也能检测到NPY mRNA的表达,说明NPY广泛地分布在HPG轴中,并参与生殖功能的调控。
  研究目的:本研究试图探究NPY在动情周期中的表达与分布的规律,并研究探讨NPY对于动情周期的维持、各级卵泡的发育与排卵的影响。
  研究方法:本研究以C57BL/6雌性小鼠为研究对象,每日定时通过阴道涂片确定动情周期,并称量子宫湿重来验证动情周期划分的准确性。取相同动情时期的卵巢组织,Real-time PCR技术检测NPY在不同动情时期中的转录水平,并提取组织蛋白用Western Bolt的方法检测蛋白水平的表达。对卵巢进行固定包埋后,通过免疫组织化学技术检测NPY在卵巢动情期的分布。腹腔注射NPY2R受体拮抗剂BIIE0246,并连续15天监测动情周期的变化是否随着NPY受体的拮抗而改变。统计卵泡计数结果,观察拮抗NPY2R受体组与对照组相比是否影响各级卵泡的发育,同时检测卵巢组织中卵泡发育相关基因的变化。超排抑制试验中,每只雌鼠注射10IU PMSG的同时注射BIIE0246(0.2ug/g),44小时后注射10IU hCG,8小时后处死小鼠眼球取血用于激素检测并计数排卵个数,药物处理组在第一次打药后每隔12小时注射BIIE0246,对照组则用等量生理盐水替代BIIE0246溶液。
  结果与结论:NPY的转录水平在动情期的表达量较其他时期有显著性差异,Western Blot的结果与Real-time PCR结果基本一致。免疫组织化学检测结果表明:动情期中,NPY除了在卵巢组织间质中表达之外,还分布在卵泡膜细胞与黄体中,这些结果提示NPY在卵巢组织中的表达受动情周期的影响。NPY在动情期中的高表达,同时分布在膜细胞中,所以我们推测NPY有可能参与了卵泡的发育和排卵。BIIE0246处理后发现,小鼠的动情周期与对照组并无差异,而卵泡计数结果显示:窦状卵泡(早期)与Graffin卵泡较对照组显著减少,闭锁卵泡显著增加,而原始卵泡、初级卵泡的数量无显著性差异。检测卵泡发育相关基因发现:c-kit、AMH、GDF-9、CD-2均显著减少、凋亡相关基因Bax、Bcl-2、Fas显著减少。超排抑制实验结果显示:BⅡE0246处理组排卵数较对照组正常超排的小鼠显著减少,检测排卵相关基因发现:Cox-2、HA-2、TSG-6、ADAMTS-1、EP-2、Egr1基因显著减少。
  所以得出结论:1.NPY随着动情周期的变化而发生变化,在动情期时表达水平最高;但是NPY不能影响动情周期。2.拮抗NPY Y2受体可以使晚期卵泡发育的成熟受阻。3.拮抗NPY受体可以导致获卵数下降。基于以上结果说明NPY与初级卵泡到次级卵泡的发育和窦状卵泡的形成相关、促进卵泡的闭锁并参与排卵的过程,NPY的受体拮抗并不改变雌性小鼠的动情周期,也不参与卵泡早期发育过程。
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